ГОСТ 13979.9-69 Жмыхи и шроты. Методика выполнения измерений активности уреазы.

    ГОСТ 13979.9-69

Группа Н69

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

 ЖМЫХИ И ШРОТЫ

 Методика выполнения измерений активности уреазы

 Oilcakes and oilmeals.

Measurement of urease activity

ОКСТУ 9146

Дата введения 1970-01-01

Постановлением Комитета стандартов, мер и измерительных приборов при Совете Министров СССР от 17 февраля 1969 года N 204 срок введения установлен с 01.01.70

Ограничение срока действия снято по протоколу N 2-92 Межгосударственного Совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 2-93)

ВЗАМЕН ГОСТ 12220-66 в части определения активности уреазы

ИЗДАНИЕ с Изменениями N 1, 2, 3, утвержденными в марте 1983 года, июне 1987 года, апреле 1995 года (ИУС 7-83, 10-87, 6-95)

ВНЕСЕНЫ: поправка, опубликованная в ИУС N 3, 2010 год; поправка, опубликованная в ИУС N 2, 2018 год; поправка, опубликованная в ИУС N 9, 2021 год, введенная в действие с 15.07.2021

1. Настоящий стандарт распространяется на жмыхи и шроты, получаемые при переработке соевых семян, и устанавливает методику выполнения потенциометрического измерения активности уреазы в интервале значений 0,01-3,00 рН.

Сущность метода заключается в изменении рН фосфатного буферного раствора, который образуется в результате воздействия уреазы на содержащуюся в растворе мочевину.

(Измененная редакция, Изм. N 1, 2, 3).

2. Отбор проб - по ГОСТ 13979.0-86.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

2а, 3-7. (Исключены, Изм. N 2).

 8. МЕТОДИКА ВЫПОЛНЕНИЯ ПОТЕНЦИОМЕТРИЧЕСКОГО ИЗМЕРЕНИЯ АКТИВНОСТИ УРЕАЗЫ

8а. Для проведения испытания должны применяться следующие аппаратура, материалы и реактивы:

весы лабораторные по ГОСТ 24104-88* класса точности 2 с наибольшим пределом взвешивания 200 г или другие весы с таким же классом точности;

________________

* С 1 июля 2002 года вводится в действие ГОСТ 24104-2001 (здесь и далее).

весы лабораторные по ГОСТ 24104-88 класса точности 3 с наибольшим пределом взвешивания 500 г, или другие весы с таким же классом точности;

рН-метр или аналогичный прибор, позволяющий измерять pH в пределах от 0 до 14 единиц pH, с разрешающей способностью не менее 0,01 единиц pH;

электрокофемолка бытовая по ГОСТ 19423-81 или аналогичное измельчающее устройство;

баня водяная с терморегулятором или другое термостатирующее устройство, позволяющее поддерживать температуру (30±2) °С;

электроплитка бытовая по ГОСТ 14919-83;

термометр жидкостный стеклянный по ГОСТ 28498-90, позволяющий измерять температуру в диапазоне 0-50 °С, с ценой деления 1-2 °С;

колба мерная 1-100-2 по ГОСТ 1770-74;

стаканы В-1-100 или В-1-150 ТС по ГОСТ 25336-82;

колбы конические Кн-2-500 (1000)-34 ТХС или колбы плоскодонные К-2-500 (1000) -34 TXC по ГОСТ 25336-82;

цилиндр 1-50, 3-50 по ГОСТ 1770-74;

сито с отверстиями 0,25 мм из набора лабораторных сит;

мочевина по ГОСТ 6691-77;

известь натронная;

раствор фосфатный буферный образцовый с рН около 7 по ГОСТ 8.135-74;

калий фосфорнокислый однозамещенный (KН

РO

) по ГОСТ 4198-75 или натрий фосфорнокислый однозамещенный 2-водный (NaH

PO

·2Н

О) по ГОСТ 245-76;

калий фосфорнокислый двузамещенный 3-водный (K

НРO

·3H

O) по ГОСТ 2493-75 или натрий фосфорнокислый двузамещенный безводный (Na

НРO

) по ГОСТ 11773-76, или натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный (Na

HPO

·12H

O) по ГОСТ 4172-76;

вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72, не содержащая углекислого газа.

Допускается применение другой аппаратуры и реактивов, по качеству и метрологическим характеристикам не уступающих перечисленным выше.

(Измененная редакция, Изм. N 1, 2, 3).

 9. ПОДГОТОВКА К ИЗМЕРЕНИЯМ

9а. Обработка дистиллированной воды

Дистиллированную воду кипятят на электроплитке в течение 15 мин для удаления углекислого газа и охлаждают в колбе, закрывающейся пробкой, снабженной трубкой с натронной известью.

(Введен дополнительно, Изм. N 1).

9б. Приготовление буферных растворов

При отсутствии стандарт-титров буферный раствор готовят следующим образом.

На весах класса точности 2 с записью результата до третьего знака взвешивают две пробы однозамещенной и двузамещенной солей калия или натрия в количествах, соответствующих приведенным в табл.2, растворяют в дистиллированной воде, подготовленной по п.9а, в мерной колбе вместимостью 1000 см

и доводят объем раствора до 1000 см

.

Полученный буферный раствор А хранят в темном месте не более 1 мес.

Для приготовления буферного раствора Б с мочевиной растворяют мочевину в растворе А в колбе вместимостью 500 или 1000 см

из расчета 1,5 г мочевины на 50 см

раствора А.

Раствор Б хранят в темном месте не более 10 дней.

Таблица 2*

Масса однозамещенной соли, г		Масса двузамещенной соли, г
KH PO	NaH PO ·2H O	NaHPO безводный	K HPO ·3H O
3,4	-	3,5	-	-
3,4	-	-	5,7	-
3,4	-	-	-	8,95
-	3,9	3,5	-	-
-	3,9	-	5,7	-
-	3,9	-	-	8,95

_______________

* Табл. 1 исключена.

(Поправка. ИУС N 9-2021).

9в. Подготовка образца

Из средней пробы методом диагонального деления отбирают пробу для анализа массой около 10 г.

Пробу измельчают до прохода не менее 60% ее через сито с отверстиями диаметром 0,25 мм. Просеянный материал вновь смешивают с остатком на сите и используют для взятия пробы.

(Поправка. ИУС N 2-2018).

При масличности продукта более 2%, после измельчения его обезжиривают в соответствии с ГОСТ 13979.2-94.

Допускается использовать содержимое патронов, оставшееся после определения масличности жмыхов и шротов, по ГОСТ 13979.2-94.

9б, 9в. (Измененная редакция, Изм. N 1, 3).

 10. ПРОВЕДЕНИЕ ИЗМЕРЕНИЙ

На весах классов точности 2 или 3 с записью результата до второго знака берут три пробы измельченного материала массой (1±0,01) г и помещают в стеклянные стаканы вместимостью 100 и 150 см

.

В один стакан приливают 50 см

раствора А и помещают его в водяную баню с температурой (30±2) °С.

Во второй и третий стаканы с интервалом в 5 мин приливают по 50 см

раствора Б и помещают их немедленно после приливания раствора в ту же водяную баню.

Время термостатирования - 30 мин, при этом следует каждые 5 мин перемешивать содержимое стаканов стеклянной палочкой, заканчивая перемешивания за 5 мин до конца нагрева. По истечении 30 мин выдержки жидкость над осадком из каждого стакана декантируют в стаканчики прибора и определяют рН каждого раствора в соответствии с прилагаемой к прибору инструкцией.

(Измененная редакция, Изм. N 1, 3).

 11. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ

Активность уреазы в единицах рН вычисляют по формуле

,

где

- значение рН в основном измерении (с раствором Б);

- значение рН в контрольном измерении (с раствором А).

За окончательный результат измерения принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных измерений, расхождения между которыми не должны превышать 30% от среднего арифметического значения рН при доверительной вероятности 0,95. Все вычисления проводят с записью результата до второго десятичного знака.

(Измененная редакция, Изм. N 1, 3).