ГОСТ Р ИСО 13629-2-2017 Материалы текстильные. Определение противогрибковой активности текстильных изделий. Часть 2. Чашечный метод.
ГОСТ Р ИСО 13629-2-2017
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
МАТЕРИАЛЫ ТЕКСТИЛЬНЫЕ
Определение противогрибковой активности текстильных изделий
Часть 2
Чашечный метод подсчета
Textiles. Determination of antifungal activity of textile products. Part 2. Plate count method
ОКС 59.080.01
Дата введения 2018-05-01
Предисловие
1 ПОДГОТОВЛЕН Акционерным обществом "Всероссийский научно-исследовательский институт сертификации" (ОАО "ВНИИС") на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии стандарта, указанного в пункте 4
2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 412 "Продукция текстильной и легкой промышленности"
3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ
4 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ИСО 13629-2:2014* "Материалы текстильные. Определение противогрибковой активности текстильных изделий. Часть 2. Чашечный метод подсчета" (ISO 13629-2:2014 "Textiles - Determination of antifungal activity of textile products - Part 2: Plate count method", IDT).
При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им национальные и действующие в этом качестве межгосударственные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном
5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Правила применения настоящего стандарта установлены в . Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего года) информационном указателе "Национальные стандарты", а официальный текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)
1 Область применения
Настоящий стандарт устанавливает метод количественного определения противогрибковой активности посредством подсчета колоний на чашках.
Настоящий стандарт применим к различным видам текстильных изделий, например волокнам, пряже, тканям, одежде, постельному белью и другим.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты*. Для датированных ссылок применяют только указанные издания. Для недатированных ссылок применяют самые последние издания, включая любые изменения и поправки.
ISO 105-F02, Textiles - Tests for colour fastness - Part F02: Specification for cotton and viscose adjacent fabrics (Текстиль. Испытания на устойчивость окраски. Часть F02. Технические условия на хлопчатобумажные и вискозные смежные ткани)
ISO 7218:2007 Microbiology of food and animal feeding stuffs - General requirements and guidance for microbiological examinations (Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие требования и рекомендации по микробиологическим исследованиям)
3 Термины и определения
В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:
3.1 контрольная ткань (control fabric): Ткань, используемая для подтверждения роста испытуемых грибков.
Примечание 1 - Контрольные образцы отбирают от контрольной ткани.
Примечание 2 - Контрольная ткань может являться той же, что и испытуемая, но не прошедшей противогрибковой обработки. При отсутствии такой возможности для контрольного образца используют ткань из 100%-ного хлопка по ИСО 105-F02, без флуоресцентных осветлителей или другой отделки, после стирки при температуре 60°С без моющих средств или осветлителей, придающих блеск, и механического прокручивания и полоскания.
3.2 противогрибковое средство (antifungal agent): Средство для предотвращения или ослабления роста грибков или снижения их количества.
3.3 противогрибковая обработка (antifungal treatment): Обработка для предотвращения или ослабления роста грибков или снижения их количества.
3.4 суспензия (взвесь) спор (spore suspension): Жидкость с равномерно диспергированными в ней грибковыми спорами в стерилизованной воде, содержащей анионное поверхностно-активное вещество.
3.5 метод подсчета колоний на чашках (plate count method): Метод, с помощью которого подсчитывают количество грибков, присутствующих после инкубации, по числу колоний, подсчитанных методом десятикратных разведений
Примечание - Результаты выражают в колониеобразующих единицах (КОЕ).
3.6 нейтрализатор (neutralizer): Химическое вещество, использующееся для дезактивации, нейтрализации или подавления противогрибковых свойств противогрибковых средств.
4 Сущность метода
Испытуемый и контрольный образцы засевают суспензией спор референтных штаммов грибков и инкубируют при температуре 30°С в течение 48 ч.
В настоящем стандарте рост грибков или противогрибковую активность определяют количественно посредством визуального подсчета колоний на чашке с агаровой средой в единицах КОЕ, а грибковую активность вычисляют по КОЕ.
Если образец абсорбирует воду, то рекомендуется использовать метод поглощения. Если образец не поглощает воду, то рекомендуется метод переноса.
5 Меры предосторожности
Установленные в настоящем стандарте методы требуют применения грибков.
Согласно ИСО 7218 такое испытание должен выполнять персонал, обладающий соответствующей подготовкой и опытом в сфере микробиологических исследований.
Обязательным являются ознакомление и соблюдение требований всех регламентов, правил и рекомендаций, касающихся соответствующих мер безопасности, в стране, где проводят эти испытания.
6 Референтные штаммы грибков
Применяемые грибки выбирают по таблице А.1 приложения А.
Можно использовать равноценные типы грибков, полученные от других агентств Всемирной Федерации коллекций культур (WFCC) по согласованию между заинтересованными сторонами.
В протоколе испытания необходимо указать номер штамма в коллекции и источник поставки использованных грибков.
7 Аппаратура
Обычное лабораторное оборудование и, в частности, следующее (при необходимости все позиции перед применением рекомендуется стерилизовать).
7.1 Марля стерилизованная.
7.2 Чашки Петри из стекла или пластика диаметрами приблизительно 90 и от 55 до 60 мм.
7.3 Автоклав, обеспечивающий поддержание температуры на уровне (121±2)°С (эквивалентно 103 кПа).
7.4 Платиновая петля для работы с колониями диаметром от 2 до 4 мм (или пластиковый эквивалент).
7.5 L-образный платиновый крюк для работы с колониями (или пластиковый эквивалент).
7.6 Инкубатор (термостат), обеспечивающий поддержание температуры в целевом диапазоне от 20°С до 37°С с допуском ±2°С.
7.8 Стеклянная воронка.
7.10 Пипетка Пастера для микробиологических исследований (или пластиковый эквивалент).
7.12 Пинцет, изготовленный из материала, который можно стерилизовать.
7.13 Центрифуга с ускорением приблизительно 2000g.
7.14 Пробирки для центрифуги.
7.16 Микроскоп с увеличением 200Х.
7.17 Компактный ультразвуковой очиститель для лабораторных инструментов, частотой приблизительно от 30 до 50 кГц.
7.18 рН-метр точностью со стеклянными электродами для биохимических исследований или равноценный.
7.20 Шаблон для резки из нержавеющей стали диаметром (3,8±0,1) см.
7.21 Гиря из нержавеющей стали массой (200±10) г и диаметром (3,5±0,1) см.
7.22 Устройство для встряхивания, способное производить встряхивание на вортексе.
7.23 Лопастная мешалка [по типу гомогенизатора Stomacher], обеспечивающая скорость от 6 до 8 ударов/с с подходящими контейнерами однократного применения.
7.24 Камера влажности, камера искусственного тропического климата или другая емкость, обеспечивающая поддержание условий высокой влажности.
7.25 Холодильник, обеспечивающий поддержание температуры на уровне от 2°С до 8°С при допуске ±2°С.
7.26 Морозильные камеры, с настройкой на температуры ниже 70°С, и ниже 20°С при допуске ±2°С.
7.27 Весы, обеспечивающие удобство считывания показания до 0,01 г.
7.28 Пластиковые мешки однократного применения для пищевых продуктов, которые используют для выемки пробы.
7.29 Бокс для микробиологических тестов (MSC Тип II) или другая система с аналогичными характеристиками.
7.30 Водяные бани, одна - для поддержания постоянной температуры (46±2)°С, другая - для поддержания температуры от 70°С до 90°С.
8 Реактивы и питательные среды
Реактивы, используемые в испытаниях, должны быть аналитической чистоты и/или марки, соответствующей применению в микробиологических анализах.
Обезвоженные продукты, имеющиеся в продаже, рекомендуется использовать при приготовлении питательных сред строго в соответствии с инструкциями изготовителя.
8.1 Чистая вода
Вода аналитической чистоты для микробиологических сред и приготовления реактивов, которая получена непосредственно после дистилляции и/или ионообменника, или ультрафильтра и/или профильтрована с помощью обратного осмоса (ОО = RO). Она не должна содержать токсичных или подавляющих рост грибков веществ.
8.2 Анионное поверхностно-активное вещество
8.3 Питательная среда
Используют питательную среду, приготовленную, как описано ниже. Можно использовать готовые имеющиеся в продаже среды после соответствующего подтверждения правильности выбора.
Для питательных сред, которые не будут использованы сразу же после приготовления, рекомендуется хранение при температуре от 5°С до 10°С сроком хранения не более 1 месяца.
8.3.1 Бульон Сабуро с декстрозой (SDB)
|
|
Пептон | 10 г. |
Декстроза | 20 г. |
Чистая вода | 1000 см . |
Уровень рН после стерилизации | 5,6±0,2. |
8.3.2 Картофельный агар с декстрозой (PDA)
|
|
Вытяжка из картофеля | 200 г. |
Декстроза | 20 г. |
Агар | 15 г. |
Чистая вода | 1000 см . |
Уровень рН после стерилизации. | 5,6±0,2. |
Эта среда способствует спорообразованию грибков. |
|
8.3.3 Агар Сабуро с декстрозой (SDA)
|
|
Пептон мясной пепсиновый
| 10 г. |
Декстроза
| 40 г. |
Агар
| 15 г. |
Чистая вода
| 1000 см (конечный объем). |
Необходимо следовать инструкциям поставщика.
|
|
Уровень рН после стерилизации | 5,6±0,2. |
Примечание - Данная среда будет использована для метода переноса.
8.3.4 Культура на скошенном агаре
8.3.4.2 Затыкают пробирку пробкой из хлопковой ваты и стерилизуют паром.
8.3.4.3 После стерилизации помещают пробирку под углом приблизительно 15° относительно горизонтального уровня на чистом лабораторном столе и оставляют до застывания содержимого.
8.3.4.4 Если на застывшем агаре не выступает вода, то для использования растворяют и отверждают среду заново.
8.3.5 Нейтрализующий раствор, среда SCDLP
|
|
Полисорбат 80 | 30 г. |
Лецитин яичного желтка | 3 г. |
Гистидина гидрохлорид | 1 г. |
Мясной или казеиновый пептон | 1 г. |
Хлорид натрия (NaCI) | 4,3 г. |
Дигидрофосфат калия | 3,6 г. |
Гидрофосфат натрия обезвоженный | 7,2 г. |
Вода | 1000 см (конечный объем). |
Уровень рН после стерилизации | 7,2±0,2. |
Для получения доступа к полной версии без ограничений вы можете выбрать подходящий тариф или активировать демо-доступ.