ГОСТ 10444.14-91 Консервы. Метод определения содержания плесеней по Говарду.
ГОСТ 10444.14-91
Группа Н59
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
КОНСЕРВЫ
Метод определения содержания плесеней по Говарду
Canned foods. Method of Howard mould count
МКС 07.100.30
ОКСТУ 9109
Дата введения 1993-01-01
ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ
1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Всесоюзным научно-исследовательским и проектно-конструкторским институтом продуктов детского питания и систем управления агропромышленными комплексами консервной промышленности, Техническим комитетом "Продукты переработки плодов и овощей"
2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Комитета стандартизации и метрологии СССР от 23.12.91 N 2058
3. ВЗАМЕН ГОСТ 10444.14-75
4. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ
|
|
Обозначение НТД, на который дана ссылка | Номер раздела, пункта |
ГОСТ 2603-79 | 3 |
ГОСТ 5100-85 | 3 |
ГОСТ 5500-2001
| 3 |
ГОСТ 5962-67 | 3 |
ГОСТ 6613-86 | 3 |
ГОСТ 6672-75 | 3 |
ГОСТ 6709-72 | 3 |
ГОСТ 8756.10-70 | 4.3 |
ГОСТ 21400-75 | 3 |
ГОСТ 24104-88 | 3 |
ГОСТ 25336-82 | 3 |
ГОСТ 26186-84 | 4.2 |
ГОСТ 26668-85 | 2 |
ГОСТ 26669-85 | 2 |
ГОСТ 28498-90 | 3 |
ГОСТ 28562-90 | 4.2 |
5. ПЕРЕИЗДАНИЕ. Апрель 2010 г.
Настоящий стандарт распространяется на томатные продукты, плодовые пюре и соки с мякотью, в которых отсутствуют видимые признаки плесневения, и устанавливает метод подсчета количества гифов плесеней по Говарду.
Требования настоящего стандарта являются обязательными.
1. СУЩНОСТЬ МЕТОДА
Метод основан на микроскопировании продуктов в определенных условиях и заключается в определении числа Говарда: процента полей зрения с плесенями, устанавливаемого в препаратах продуктов при непосредственном микроскопировании.
2. ОТБОР И ПОДГОТОВКА ПРОБ
Метод отбора проб - по ГОСТ 26668, подготовка проб - по ГОСТ 26669.
3. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ, РЕАКТИВЫ И РАСТВОРЫ
Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания 1 кг и пределом допускаемой погрешности ±10,00 мг по ГОСТ 24104*.
_____________
* С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104-2001. На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008.
Рефрактометр, шкала которого градуирована в единицах показателя преломления, с ценой деления не более 0,001 и пределом основной допускаемой погрешности ±0,0002.
Баня водяная.
Термометр ртутный стеклянный с пределами измерений температуры 0-100 °С, погрешностью измерения не более ±1,0 °С по ГОСТ 28498.
Сито с сеткой диаметром отверстий 0,4 мм по ГОСТ 6613.
Микроскоп биологический с оптической системой, обеспечивающей просмотр препарата в плоском поле зрения диаметром 1,382 мм, с передвижным столиком, снабженным нониусом и препаратоводителем.
Камера Говарда, имеющая плоскую поверхность, опущенную на 0,1 мм окруженную канавками и имеющую выгравированный круг диаметром 1,382 мм, либо две параллельные линии на таком же расстоянии друг от друга.
Допускается применять камеры Горяева, Тома, Бюргера и другие, имеющие плоские поверхности, ограниченные канавками, опущенные на 0,1 мм относительно общей плоскости, на которые нанесены сетки из квадратов со стороной 0,05 мм.
Пипетки 1-2-10 по НТД.
Палочки из химико-лабораторного стекла по ГОСТ 21400.
Стекла покровные для камеры по ГОСТ 6672.
Мыло хозяйственное.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Спирт этиловый по ГОСТ 5962*.
_________________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000.
Эфир или ацетон по ГОСТ 2603.
Сода кальцинированная техническая по ГОСТ 5100.
Допускается применение аппаратуры с техническими характеристиками не ниже указанных.
4. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
4.1. Продукты перед анализом не термостатируют.
Каждую единицу продукции анализируют отдельно.
4.2. Подготовка к анализу томатных продуктов
Томатные продукты, содержащие целые или дробленые томаты, перед анализом протирают через сито.
В стакан отбирают 50,0 г продукта с известной массовой долей растворимых сухих веществ.
Концентрированные томатные продукты разбавляют дистиллированной водой и раствором метиленового голубого или только дистиллированной водой до массовой доли растворимых сухих веществ (8,4±0,4)% так, чтобы показатель рефракции при температуре (20±1) °С составлял 1,3446-1,3460.
При вычислении массы воды для разбавления томатных продуктов с солью предварительно определяют массовую долю хлоридов по ГОСТ 26186 и вычитают полученное значение из массовой доли растворимых сухих веществ.
Томатные продукты с массовой долей растворимых сухих веществ (8,4±0,4)% и менее используют для анализа без разведения.
Массовую долю растворимых сухих веществ в разбавленных продуктах контролируют по рефрактометру непосредственно перед заполнением камеры.
4.3. Подготовка к анализу плодовых пюре и соков с мякотью
В каждой пробе анализируемой продукции определяют массу мякоти по ГОСТ 8756.10.
Осажденную в центрифужной пробирке мякоть разбавляют дистиллированной водой и раствором метиленового голубого до массовой доли 40%.
Разбавленную мякоть используют для приготовления препарата.
4.4. Подготовка камеры
Непосредственно перед приготовлением препарата камеру последовательно промывают раствором детергента и дистиллированной водой, спиртом, эфиром или ацетоном. Камера считается подготовленной к анализу в том случае, если покровное стекло плотно притирается к ней с образованием ньютоновских (радужных) колец на внешней по отношению к канавкам поверхности камеры.
Бактериологической петлей, шпателем или скальпелем отбирают часть продукта и переносят в центр в углубление камеры между канавками. Углубление камеры заполняют анализируемым продуктом настолько, чтобы продукт полностью покрыл поверхность камеры между канавками, но не попал в канавки и по другую сторону от них. Затем на камеру помещают ребром покровное стекло так, чтобы оно касалось продукта, и, плавно наклоняя, опускают его на углубление камеры, заполненное продуктом. Края покровного стекла притирают к камере до появления ньютоновских колец.
4.5. Подготовка микроскопа
5. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
5.1. Из каждой пробы для анализа готовят четыре препарата.
5.2. Препарат помещают на препаративный столик микроскопа и просматривают, передвигая его так, чтобы одно и то же место препарата не попало повторно в поле зрения микроскопа. Подсчет гиф плесеней начинают с одного из углов препарата, передвигая поле зрения на (1,5±0,1) мм с помощью нониуса. Просмотрев поля в одном ряду, перемещают препарат в следующий ряд. Расстояние между центрами полей зрения в просмотренном ряду и новом должно быть (1,5±0,1) мм.
Применение метиленового голубого позволяет установить на синем фоне препарата сине-зеленые нити гиф.
5.3. В каждом препарате просматривают 25 полей зрения, расположенных равномерно по всему препарату. В каждом поле зрения отмечают наличие или отсутствие гиф плесеней, пользуясь их характеристикой, приведенной в приложении.
6. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
6.1. Число Говарда определяют в каждой пробе продукции.
Результат определения выражают как процент полей зрения, содержащих гифы плесеней.
6.4. Если при просмотре первых 10 полей зрения все поля положительные, то просмотр прекращают и дают заключение о том, что число Говарда в пробе (процент положительных полей зрения) более 80.
Если при просмотре первых 10 полей зрения все поля отрицательные, то просмотр прекращают и дают заключение, что число Говарда в пробе менее 10%.
ПРИЛОЖЕНИЕ
Справочное
ХАРАКТЕРИСТИКА ГИФ ПЛЕСЕНЕЙ
Под микроскопом гифы плесеней имеют ряд особенностей, отличающих их от остатков ткани плодов.
Гифы плесеней сегментированы или гранулированы; нити плодов прозрачные, стекловидные или волокнистые. Гифы плесеней имеют характерную разветвленность, образуя, как правило, острый угол, сосудисто-волокнистые ткани плодов видны под микроскопом в виде свернутых спирально пружин. Если последние разрушены, то они отличаются от гиф плесеней по характерному завитку. Волоски, окружающие оболочку семени томатов или покрывающие поверхность плодов, тонкостенные, длинные, суживающиеся на конус, под микроскопом имеют вид сосульки. Гифы плесеней имеют трубчатое, цилиндрическое строение и под микроскопом выглядят плоскими, с параллельными стенками.
Характерные особенности гиф плесеней и тканевых остатков плодов, позволяющие отличать одно от другого, приведены в таблице и на чертеже.
|
|
|
Наименование показателя | Характеристика для | |
| плесневых структур | тканевых остатков плодов |
1. Форма | Тонкие длинные трубочки | Формы не трубчатые, а сферические, прямоугольные, аморфные и т.д. |
2. Стенки | Две параллельные, хорошо видимые стенки, никогда не заканчивающиеся острым концом. Обе стенки видны в одном фокусе, на протяжении всей их длины стенки одинаковые, за исключением оборванных концов. Иногда часть стенок можно рассмотреть с использованием большого увеличения (200 ) | Структуры, как правило, не имеющие двух стенок; если же две стенки имеются, то они исчезают в некоторых местах. При наведении на фокус стенки оказываются перекрученными или расстояние между стенками неравномерное |
3. Цитоплазма | Между стенками имеется цитоплазма (которая не всегда видна при увеличении 100-150 ), часто разделенная на длинные или короткие участки, заканчивающиеся тупыми концами. Иногда цитоплазма имеет гранулированное строение (в виде точек, кружков, извилистых пятен) | Между стенками и между видимыми участками стенки цитоплазма отсутствует. Между стенками могут просматриваться длинные или короткие темные полосы, более или менее параллельные стенкам |
4. Концы | Концы гиф тупые или заканчиваются плавным закруглением | Концы нитчатых форм, оканчивающиеся незаметно, имеют расщепления, расширяются или суживаются на конус |
5. Боковые ветви | Боковые ветви гиф в точке разветвления образуют острый угол | Ветви нитчатых форм вырастают одна из другой, могут образовывать сетку или иметь расщепление |
6. Изгибы стенок | Изгибы стенок гиф неравномерны, за исключением некоторых частей | Изгибы стенок нитчатых форм однородные или же длинные, прямые, выглядят жесткими |
ГИФЫ ПЛЕСЕНЕЙ ПОД МИКРОСКОПОМ В ПРЕПАРАТЕ ПРОДУКТОВ
|
|
|
Параллельные стенки одинаковой толщины | Оба конца прямые или (иногда) один закруглен
| Ветвление |
Грануляция
|
| Перегородки
|
|