ГОСТ ISO 6498-2014 Корма, комбикорма. Подготовка проб для испытаний.

ГОСТ ISO 6498-2014

 МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

 КОРМА, КОМБИКОРМА

 Подготовка проб для испытаний

 Feeds, compound feeds. Preparation of samples for testing

МКС 65.120

Дата введения 2016-01-01

 Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 ПОДГОТОВЛЕН Открытым акционерным обществом "Всероссийский научно-исследовательский институт комбикормовой промышленности" (ОАО "ВНИИКП") на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии стандарта, указанного в пункте 5

2 ВНЕСЕН Межгосударственным техническим комитетом по стандартизации МТК 4 "Комбикорма, белково-витаминные добавки, премиксы"

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 29 августа 2014 г. N 69-П)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 7 ноября 2014 г. N 1491-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 6498-2014 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2016 г.

5 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 6498:2012* "Корма для животных. Руководящие указания по приготовлению проб для испытания" (Animal feeding stuffs - Guidelines for sample preparation, IDT).

Международный стандарт разработан подкомитетом SC 10 "Корма для животных" Технического комитета по стандартизации ISO/TC 34 "Пищевые продукты" Международной организации по стандартизации (ISO).

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного стандарта для приведения в соответствие с ГОСТ 1.5 (подраздел 3.6)

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

7 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Апрель 2020 г.

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.

В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"

      1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на корма, в том числе на корма для непродуктивных животных, комбикорма и устанавливает руководящие указания по подготовке анализируемых проб из лабораторных проб.

Примечание - Требования настоящего стандарта основываются на руководящих положениях [7].

Допускается для отдельных методов испытаний применять другие требования к подготовке проб, определенные нормативно-правовыми документами.

Примечания

1 Такие специфические методы испытаний утверждаются международными и национальными органами по стандартизации

2 Настоящий стандарт не включает требования к подготовке проб для микробиологического анализа кормов, по таким показателям, как дрожжи, бактерии и плесень. Тем не менее, в настоящем стандарте указаны некоторые важные аспекты подготовки проб для микроорганизмов, которые используются в качестве кормовых добавок (пробиотиков).

      2 Термины и определения

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями.

      2.1 Определения, связанные с термином "проба"

2.1.1 партия (lot): Определенное количество материала, полученное в результате одного и того же производственного процесса и представленное с соблюдением правил отбора проб.

Примечание - Для целей настоящего стандарта используются правила [3].

2.1.2 лабораторная проба (laboratory sample): Проба, подготовленная (от партии) для отправки в лабораторию и предназначенная для осмотра или исследований.

2.1.3 анализируемая проба (test sample): Подвыборка или проба, взятая из лабораторной пробы, из которой далее могут взять навески для исследований.

2.1.4 навеска (test portion): Количество корма, взятого из анализируемой пробы (или из лабораторной пробы, если это одно и то же).

2.1.5 контрольная проба (reserve sample): Материал, оставшийся от лабораторной пробы после деления или отбора анализируемой пробы и который в дальнейшем не измельчается.

Примечание - Если, например, анализы микотоксинов или генетически модифицированных организмов проводятся на всей лабораторной пробе, то затем контрольную пробу также размалывают до частиц соответствующих размеров. Контрольная проба должна храниться в условиях, обеспечивающих ее неизменность.

2.2 Определения, связанные с термином "параметр"

2.2.1 параметр (parameter): Анализируемое вещество или элемент, или микроорганизм, по которым корм должен быть проанализирован микроскопическим, микробиологическим, биологическим или химическим методами.

2.2.1.1 стабильный параметр (stable parameter): Анализируемое вещество или элемент, или микроорганизм, которые не разрушаются при подготовке пробы, а также во время транспортирования или хранения при комнатной температуре от 20°С до 25°С.

2.2.1.2 нестабильный параметр (unstable parameter): Анализируемое вещество или элемент, или микроорганизм, которые разрушаются при подготовке пробы или во время транспортирования, или хранения при комнатной температуре от 20°С до 25°С, потому что они являются летучими, разлагаемыми или чувствительными к температуре, свету, ферментативному расщеплению или химическому окислению.

Примечание - Стабильность параметров в этом контексте относится только к влиянию подготовки пробы, такой как интенсивный размол, а не к минимальному сроку годности, указанному производителями на этикетке, например, для кормов (добавок).

Таблица 1 - Общая классификация стабильных или нестабильных параметров и причины их ухудшения от вида подготовки проб

Источник	Стабильные параметры	Нестабильные параметры	Причина(ы) ухудшения/изменения
Питательные вещества	(Сырые) протеин, жир, зола, клетчатка	Влажность	Температура (летучесть)
	Крахмал, сахар, лактоза	Аммиак	Температура (летучесть)
	Выделенный газ и ферменты, растворенные в органическом веществе, при исследовании in vitro	Органические кислоты (например, молочная кислота, азотная кислота, масляная кислота, фумаровая кислота, муравьиная кислота)	Температура (летучесть)
	Минералы (например, Са, Р, Mg, Na, K, Cl)	Ненасыщенные жирные кислоты	Окисление кислородом воздуха (может привести к производству короткоцепочечных жирных кислот)
Кормовые добавки	Микроэлементы (например, Cu, Zn, Mn, Fe, Se, Co)	Витамины (например, витамины А, С, D, E)	Температура, ультрафиолетовый (УФ) свет, окисление кислородом воздуха (чувствительность)
	Аминокислоты (например, лизин, метионин, триптофан)	1,2-пропандиол, этиленгликоль	Температура (летучесть)
	Ферменты (например, фитаза, не крахмальный полисахаридный фермент)	Микроорганизмы, такие как пробиотики (например, сахаромицет cerevisiae, энтерококк faecium)	Температура (замораживание), давление (чувствительность к измельчению); влажность/сухость (влияние на рост микроорганизмов)
Нежелательные вещества	Тяжелые металлы(например, As, Pb, Cd, Hg)	Микотоксины (например, афлатоксин , дезоксиниваленол, фумонизин, охратоксин А, Т-2 токсин, НТ-2 токсин, зеараленон, алкалоиды спорыньи)	Рост плесени и изменения микотоксинов возможны при комнатной температуре; ультрафиолетовом свете (чувствительные - афлатоксин )
	Диоксины и полихлорированные бифенилы (ПХБ) с эффектами похожими на диоксины	Препараты, антибиотики, пестициды	Температура (чувствительность)
	-	Синильная кислота	Температура (летучесть)
Запрещенные вещества	Белки животного происхождения	Запрещенные препараты, запрещенные антибиотики	Температура (чувствительность)
(Другие) Микроорганизмы	-	Дрожжи, бактерии, грибки	Температура (чувствительность) сухость, приток кислорода (анаэробиоз)

      2.3 Примеры характеристик кормов для животных

Примеры характеристик кормов для животных приведены для оказания помощи в идентификации и классификации лабораторной пробы в соответствии с терминами и приложениями, используемыми в настоящем стандарте.

Примечание - Определения кормов для животных приведены в национальных законодательствах стран.

2.3.1 корм для птиц (birdseed): Семена, предназначенные для кормления птиц.

Пример - Зерно и семена масличных культур.

2.3.2 хлопок-сырец (whole cottonseed): Необработанная коробочка хлопчатника, в том числе шелуха, пух и ядро.

2.3.3 минеральная смесь (mineral mix): Дополнительный корм, который в основном состоит из минеральных компонентов в гранулах шарообразной или другой формы, мелких гранул, который является сыпучим, как все смеси.

Примечание - Минеральные гранулы формируются из минеральных смесей механическим способом (в основном).

2.3.4 сухие корма (dry feeds): Комбикормовое сырье и готовые корма для животных, которые обычно содержат массовую долю влаги не более 14%.

Примечание - Сухие кормовые гранулы формируются из сухих кормов механическим способом (в основном).

2.3.5 зеленый корм (green fodder): Съедобные части растений, кроме зерна, которые могут скармливаться животным в свежем виде, в том числе молодые побеги, травы.

Примечание - Как правило, этот термин относится к более усваиваемым растительным материалам в отличие от менее усваиваемых материалов, известных как грубые корма.

2.3.6 силос (silage): Корм из свежескошенной или подвяленной зеленой массы, законсервированный в анаэробных условиях органическими кислотами, образующимися в результате преимущественно молочнокислого сбраживания, или законсервированный добавлением химических консервантов.

2.3.7 грубые корма (roughage): Волокнистые, грубо текстурированные части растений.

Пример - Грубые части растений, солома, шелуха, початки и стебли.

2.3.8 сено (hay): Надземная часть травы, специально скошенная, высушенная и используемая для кормления животных.

2.3.9 сенаж (haylage): Корм, сохраненный в сочном состоянии органическими кислотами, образующимися в результате анаэробной ферментации сахаров в корме с массовой долей влаги около 45%.

2.3.10 полнорационная смесь (total mixed ration, TMR): Однородная смесь всех кормовых компонентов (кормов, зерна и добавок), которая скармливается животным в течение 24-часового периода.

Примечание - На практике, в течение 24 ч смеси могут скармливаться в одно или несколько кормлений.

2.3.11 побочный продукт (byproduct): Продукт, который остается после производства продукции из растительного сырья.

Пример - Высушенная зерновая барда (DDGS) в процессе брожения.

2.3.12 семена масличных культур (oilseed): Семена, из которых извлекают масло.

Пример - Семена подсолнечника.

2.3.13 корм в больших блоках, кормовая меласса в блоках (large block feed, molasses block feed): Корм, спрессованный в твердую массу, которая является достаточно плотной, чтобы сохранять свою форму.

Примечание - Большой блок корма весит, как правило, от 1 кг до 20 кг. Он может быть в виде минерального блока или "карамелизированного" куска мелассы и содержать различные минералы и питательные вещества. Пробы могут быть приняты в лаборатории в виде больших кусков, шаров или "липких сгустков".

2.3.14 жидкий корм (liquid feed): кормовой продукт, не являющийся твердым или газообразным.

Примечание - Жидкий корм содержит достаточное количество влаги, чтобы легко течь, и может содержать мелассу. 2.3.13

2.3.15 консервированные корма для непродуктивных (домашних) животных (canned pet food): Кормовые продукты для домашних животных, которые были обработаны, расфасованы, герметично закрыты и стерилизованы для хранения в банках или аналогичных емкостях.

2.3.16 полувлажные корма (semi-moist feed): Кормовые продукты на мясной основе для домашних или животных, обитающих в водной среде, которые были частично высушены для предотвращения порчи в результате микробного загрязнения.

Примечание - Массовая доля влаги может находиться в диапазоне от 14% до 40%.

2.3.17 жевательные корма для собак, кости из сыромятной кожи (dog chew, rawhide bone): Мясо и кожа или полоски кожицы, которые были почти полностью высушены до консистенции кожи.

2.3.18 премикс (premixture): Комбикормовая добавка, представляющая собой однородную смесь микрокомпонентов комбикормовой продукции и наполнителя, предназначенная для обогащения комбикормов и белково (амидо)-витаминно-минеральных добавок.

Примечание - Премиксы используются для облегчения равномерного распределения ингредиентов (например, витаминов, пробиотиков, препаратов или антибиотиков) в готовом корме.

2.3.19 сено в брикетах и в виде гранул (range and alfalfa hay pellet): Агломерированные корма, сформированные путем прессования и выдавливания смеси, например через квадратные отверстия, механическим способом.

Примечание - Гранулы, в основном, около 2 см в диаметре и 5 см в длину (объемом около 16 см

), могут содержать мелассу; данное определение также относится к сену в кубах (нарезанное сено) больших размеров.

2.3.20 текстурированные, липкие корма (texturized feed, sticky feed): Смесь различных зерновых и гранулированных кормов, которые были подвергнуты поверхностной обработке, например, мелассой.

Примечание - Некоторые зерна могли быть нагреты паром или предварительно расплющены перед введением в текстурированные корма.

2.3.21 корма для животных, обитающих в водной среде (aquatic feed): Корма, которые скармливают животным, обитающим в водной среде, и которые были механически обработаны в инкапсулированные гранулы, хлопья, крошку, капсулированный порошок.

      2.4 Определения, связанные с "процедурой подготовки проб"

2.4.1 однородность (homogeneity): Состояние, при котором свойства или элементы равномерно распределены по всему корму

Примечание - Однородность может считаться достигнутой в практическом смысле, когда ошибка выборки обработанного участка пренебрежимо мала по сравнению с общей погрешностью измерения системы. Однородность зависит от размера единиц рассматриваемой смеси двух кормов и может быть неоднородной на молекулярном или атомном уровне, но достаточно однородной на практическом уровне. Тем не менее, равномерный внешний вид не обеспечивает композиционной однородности.

2.4.2 предварительная сушка (partial drying): Часть процедуры пробоподготовки кормов с высоким содержанием влаги (массовая доля сухих веществ менее 86%), в которой пробу тщательно сушат, чтобы можно было применить последующие процедуры подготовки пробы, например, уменьшение размера частиц путем измельчения на мельнице.

Примечания

1 Процедура предварительной сушки зависит от вида кормов (например, при температуре ниже 55°C-60°C для силоса) и от термостабильности параметров (например, 70°С±10°С для лекарств и антибиотиков).

2 Образцы для микробиологического анализа не должны сушиться (при температуре выше 40°C).

3 Предварительная сушка может быть также достигнута путем сушки вымораживанием, которая заключается в тщательном процессе сушки с использованием вакуума, чтобы испарилась влага.

2.4.3 грубое измельчение (coarse grinding): Первая стадия измельчения всей пробы перед сокращением массы, если лабораторная проба содержит большие куски или когда размер ее частиц превышает 6 мм.

Примечание - Грубый помол является особым видом уменьшения размера частиц, что обеспечивает однородность лабораторной пробы для получения анализируемой пробы.

2.4.4 сокращение массы (mass reduction): Часть процедуры подготовки пробы для уменьшения массы лабораторной пробы и получения анализируемой пробы путем деления с помощью делителей (стационарных или роторных) или ручным (альтернативным) делением, без изменения однородности образца.

Примечание - После сокращения массы все анализируемые пробы должны иметь те же свойства, что и исходная лабораторная проба.

2.4.5 уменьшение размеров частиц (измельчение) (particle size reduction): Часть процедуры подготовки пробы, которая достигается путем дробления, резки, гомогенизации, размачивания, давления, трения до получения однородной пробы для дальнейшего исследования.

Примечание - В основном, уменьшение размеров частиц является следующим шагом после сокращения массы в процедуре подготовки пробы с подбором размеров сит для обеспечения неизменности анализируемой пробы.

Рисунок 1 - Иллюстрация определений, связанных с терминами "проба", "параметр" и "процедура подготовки проб"

      3 Сущность подготовки проб

Все этапы подготовки проб зависят от свойств корма и показателей, которые должны быть проанализированы. В каждом случае требуется рассмотрение каких-либо специальных указаний в отношении подготовки пробы с учетом методов анализа.

Настоящий стандарт описывает процедуру подготовки лабораторной пробы (с минимальной массой 500 г) до однородной анализируемой пробы (с минимальной массой 100 г) с теми же свойствами и составом, свободной от загрязнений.

В некоторых случаях масса лабораторной пробы может быть меньше 500 г (например, для кормовых добавок), но необходимо соблюдать установленные правила и, в любом случае, масса анализируемой пробы должна быть достаточно большой, чтобы проба была представительной.

Вся лабораторная проба подвергается сокращению массы и измельчению для получения одной или нескольких анализируемых проб для исследования стабильных и нестабильных параметров, для микроскопических исследований и для хранения. Если протокол исследований и предполагаемое хранение пробы позволяет, то лабораторную пробу желательно сначала полностью измельчить до размера частиц грубого помола перед последующим измельчением, чтобы обеспечить однородность пробы.

Полученные результаты анализа навески (от 0,05 г до 25,00 г и более), взятой для взвешивания из подготовленной анализируемой пробы корма, должны распространяться на лабораторную пробу и, в конечном итоге, в целом на партию, из которой она была взята.

Все этапы подготовки проб выполняют быстро, в условиях, исключающих разрушение нестабильных параметров, загрязнение и окисление под действием чрезмерных температур, дневного света, воздуха или остатков от используемого вещества или от пробы, подготовленной ранее или одновременно. В частности, должно быть предотвращено загрязнение от пробы к пробе.

При подготовке пробы следует избегать потери или изменения массовой доли (содержания) влаги. В любом случае необходимо учитывать, что окончательные результаты испытаний требуют поправки (на натуральное содержание влаги, массовую долю сухих веществ 88% или 100%).

Для кормов с высоким содержанием влаги (с массовой долей сухого вещества менее 86%) перед сокращением массы необходимы частичная сушка или сушка вымораживанием.

Для кормов с кусками или с размером частиц более 6 мм до сокращения массы или деления необходимо провести грубое измельчение всей лабораторной пробы до размера частиц менее 6 мм.

На каждом этапе пробоподготовки для сохранения свойств исследуемого материала пробы должны храниться в соответствующих условиях (например, при комнатной температуре, охлажденные, замороженные, в герметичном контейнере, защищенном от света или в темноте).

Для микробиологических анализов все этапы пробоподготовки должны проводиться в асептических условиях. Лабораторные пробы не должны ни замораживаться, ни подогреваться выше температуры 40°С, ни находиться в вакууме или в пространстве с содержанием кислорода выше, чем в атмосферном воздухе.

      4 Рассмотрение ошибок подготовки проб

Изучение процедуры подготовки проб показало, что основные источники крупнейших лабораторных ошибок обычно упускаются из виду. Эти ошибки подготовки проб могут оказаться значительно больше, чем ошибки, полученные в результате последующих аналитических процедур.

      4.1 Ошибки при выделении анализируемой пробы

4.1.1 Общие ошибки

Ошибки, полученные из-за неоднородности пробы и увеличивающие общую погрешность деления (TSE), возникают по двум причинам [12].

4.1.2 Структурная неоднородность

Первой причиной является структурная неоднородность, когда частицы лабораторной пробы не одинаковы (форма, размер, плотность и т.д.). Если существует большое различие между отдельными фрагментами, то структурная неоднородность велика, но если фрагменты являются более однородными, то структурная неоднородность ниже. Ошибка, вызванная структурной неоднородностью, не может быть равна нулю, так как это будет означать, что все фрагменты строго идентичны. Перемешивание и смешивание не меняет структурную неоднородность. Одним из способов изменения структурной неоднородности любого материала является измельчение (дробление или резка) или другие методы, которые изменяют физические свойства пробы. Уменьшение среднего размера частиц является доминирующим фактором в снижении структурной неоднородности.

Поэтому перед делением, для сокращения структурной неоднородности, необходимо проводить предварительное грубое измельчение всей лабораторной пробы.

Эту основную ошибку деления (FSE) можно контролировать путем выделения представительной анализируемой пробы (см. 4.2). То есть, необходимо отобрать анализируемую пробу достаточной массы, чтобы гарантировать попадание всех различных частиц в анализируемую пробу при делении. Чем крупнее частицы материала, тем больше должна быть масса анализируемой пробы, которая сведет ошибку к минимуму.

4.1.3 Неоднородность распределения

Второй причиной является неоднородность распределения, возникающая в результате действия гравитационных сил на частицы различной плотности, размеров и формы, что приводит к их группировке и сортировке. Пробы с большими различиями в размере или плотности частиц, как правило, разделяются или сильно расслаиваются, частицы с меньшим размером или плотные частицы располагаются в нижней части пробы. Для наглядности представьте себе лабораторную пробу, состоящую из черных и белых шаров, существенно различающихся по размеру. Если все черные шары находятся в нижней части пробы, а белые - в основном вверху, то система показывает очень высокую неоднородность распределения. Если шары были бы хорошо смешаны (гомогенизированы), то неоднородность распределения системы была бы значительно меньше.

Чтобы уменьшить ошибку группировки и сортировки (GSE), лабораторную пробу тщательно перемешивают, а затем делят на анализируемые пробы. Для многих кормов смешивания бывает недостаточно, так как оно может фактически увеличить расслоение вместо уменьшения ошибки распределения. Пока сила тяжести существует, будет существовать и расслоение. Многие корма имеют природную склонность к расслоению, например, сразу после смешивания суспензий и фракционированного корма высокой плотности. Такие корма требуют постоянного контроля и коррекции, и после того, как установлено это свойство, ошибки распределения можно избежать.

Составление анализируемой пробы путем сбора многих случайных порций из лабораторной пробы всегда уменьшает ошибку неоднородности распределения, требует меньше времени и оборудования. Рекомендуется составлять анализируемую пробу из тридцати порций. Для очень неоднородных кормов требуется большее количество порций, и, если известно, что корм мало расслаивается, то порций может быть меньше, но ни в коем случае не менее десяти.

4.1.4 Другие ошибки

Другие ошибки, возникающие при подготовке проб, включают потерю или приобретение анализируемого вещества и связаны с процессами обработки, такими как измельчение, нагревание, потеря мелких фракций, загрязнение и электростатическое разделение. Эти ошибки могут быть большими и обычно являются результатом небрежности или отсутствия знаний.

      4.2 Минимальная масса

Представительные анализируемые пробы должны быть получены с учетом основных ошибок (FSE), максимального размера частиц и иметь достаточную массу (см. таблицу 2).

Требуемая масса зависит от приемлемой ошибки деления или расслоения, от плотности, неоднородности, содержания анализируемого вещества в корме и от максимального размера частиц (см. приложение А).

Таблица 2 - Минимальная масса: ожидаемый коэффициент вариации (CV) лабораторных делений; принятая плотность 1 г/см

Максимальный размер частиц, мм	FSE (ожидаемый CV), %
	15	10	5	2	1
	Минимальная масса, г
0,5	0,06	0,13	0,5	3	12,5
0,75	0,2	0,4	2	10,5	42
1	0,4	1	4	25	100
2	4	8	32	200	400
5	56	125	500	3130	12500
Примечание - Для кормов с плотностью, не равной 1 г/см , значения могут быть умножены на плотность, например, для корма с максимальным размером частиц 2 мм, ожидаемым CV деления 5% и плотностью 0,5 г/см потребуется минимальная масса анализируемой пробы 16 г.

      4.3 Ошибки, связанные с методами деления

В таблице 3 на модели смеси частиц песка показаны ошибки, связанные с различными методами деления. На рисунке 2 показана репрезентативность сокращения массы (сумма ошибок деления, связанных с точностью и аккуратностью) с применением 17 различных устройств на модели смеси, содержащей 89,9% пшеницы, 10,0% рапса и 0,1% стекла [11], [12]. Основным различием в методах сокращения массы является выбор количества порций. Для достоверности метода, которую трудно или невозможно получить ручными методами деления, следует правильно выбрать устройство сокращения массы (например, с равной вероятностью для отбора всех частиц, без потерь частиц, оседающих под действием силы тяжести, или с параллельными сокращениями). Методы сокращения массы, основанные на ручном делении проб, имеют серьезные недостатки, связанные с точностью и вероятностью попадания мелких компонентов, которые могут быть частично потеряны при делении [11], [12]. Из таблицы 3 и рисунка 2 можно сделать вывод, что большее количество порций приводит к улучшению деления лабораторных проб за счет уменьшения ошибки. Например, роторный делитель производит несколько сотен делений, стационарные желобковые делители - от 10 до 34 делений, конусные делители и квартование - только два. Поэтому конусные делители и квартование не рекомендуются для применения в лабораторных условиях, т.к. такой метод деления может внести большую долю в общую погрешность анализа. Конечным шагом деления лабораторной пробы является получение навески, при этом отношение массы лабораторной пробы и массы навески должно составлять от 100 до 10000. Для получения навески рекомендуется избегать сокращения массы пробы ручным делением, за исключением случаев, когда ошибка деления проб незначительна по сравнению с общей аналитической ошибкой.

Таблица 3 - Результаты испытаний разделения смеси, содержащей 60% крупнозернистого песка и 40% мелкого песка, Р=0,6 [1].

Метод	Количество делений	Стандартное отклонение деления, %, SR	Дисперсия, %,	Расчетный максимум ошибки деления, %
Конусные делители и квартование	2	6,81	46,4	22,7
Стационарные желобковые делители	от 10 до 12	1,01	1,02	3,4
Роторные делители	более 100	0,125	0,016	0,42
Случайный вариант	-	0,076	0,00058	0,25
Имеются стационарные делители с большим числом делений и меньшей ошибкой деления [11].

Рисунок 2 - Результат репрезентативности, r

, равный площади смещения плюс квадрат точности, для модели смеси пшеницы, рапса и стекла

Примечание - Репрезентативность должна быть как можно более низкой. Более высокие суммы означают снижение надежности. RK n указывает скорость делителя с n желобами [11].

      5 Требования безопасности

Мельницы для измельчения, резки и истирания имеют острые лопасти. Не кладите руки или пальцы в камеры мельниц для введения пробы. Не открывайте мельницу, пока она полностью не остановилась. Убедитесь, что защитные блокировки на всем оборудовании работают правильно.

Используйте соответствующие средства индивидуальной защиты в соответствии с требованиями в лаборатории. На этапе подготовки проб для анализа безопасность имеет большое значение.

Используйте систему вентиляции во время процедур с пылеобразованием. Для чистки области кожуха, мельницы и рабочей зоны от пыли используйте пылесос.

Убедитесь, что все электрооборудование заземлено и может эксплуатироваться. Не кладите металлические предметы или алюминиевую фольгу в микроволновую печь при ее использовании для сушки образцов.

      6 Оборудование

Все используемое оборудование должно предотвращать загрязнение и окисление пробы во время подготовки.

Используют обычное лабораторное оборудование и, в частности, следующее.

      6.1 Оборудование для подготовки проб

6.1.1 Щетки для очистки дробилок и т.д.

6.1.2 Компрессор со сжатым воздухом для очистки.

6.1.3 Пылесос.

6.1.4 Устройства для обеззараживания мельниц, оборудование для дезинфекции и газопламенной обработки для микробиологических анализов.

      6.2 Системы сушки

6.2.1 Система лиофильной сушки, сушильный шкаф с вентиляцией, который может поддерживать температуру на уровне (55±5)°C или микроволновая печь бытового типа, или вакуумная печь.

6.2.2 Чаша влагостойкая (лоток), изготовленная из пластмассы, алюминия или стекла, например, с диаметром не менее 50 мм и глубиной не более 40 мм.

      6.3 Оборудование для сокращения массы и измельчения влажных кормов (например, фуража, силоса)

6.3.1 Ножницы садовые для резки кормов, ножницы для небольших объемов проб или лабораторный измельчитель кормов для больших объемов и керамический нож, рекомендуемый при определении микроэлементов.

6.3.2 Мельница режущая с размером отверстий сит 6 мм и 1 мм.

6.3.3 Мясорубка с размером отверстий решетки 1 мм.

6.3.4 Делитель желобковый с минимальной шириной желоба не менее (2d+5) мм, где d - диаметр наибольшей частицы.

6.3.5 Ножи стерильные или продезинфицированная мельница для микробиологического анализа (например, пробиотиков).

      6.4 Оборудование для сокращения массы и измельчения сухих кормов (например, зерновых, минеральных смесей, гранулированных кормов)

6.4.1 Делитель желобковый.

6.4.2 Делитель роторный с вибрационным питателем.

6.4.3 Мельница режущая с набором сит с отверстиями 1,0; 0,5 и менее 0,5 мм.

6.4.4 Мельница режущая с ситами с отверстиями от 4 до 6 мм.

6.4.5 Мельница режущая и смешивающая (например, блендер или бытовая кофемолка).

      6.5 Оборудование для хранения проб

6.5.1 Флаконы стерильные с герметичными крышками (например, бутылки из коричневого стекла для проб с нестабильными параметрами, такими как витамины) и для микробиологических целей.

6.5.2 Емкости с широкой горловиной с завинчивающейся крышкой из пластика.

6.5.3 Пакеты полиэтиленовые стерильные, герметично закрывающиеся, предназначенные для вакуумной упаковки для микробиологических целей.

6.5.4 Холодильник.

6.5.5 Морозильник.

      7 Подготовка проб

      7.1 Общие рекомендации

После регистрации, проверки, в том числе температуры, гомогенизации лабораторной пробы (см. 7.2), следующим этапом является процедура сокращения массы (см. 7.3).

На втором этапе частицы в анализируемых пробах уменьшаются до адекватных размеров, чтобы свести к минимуму ошибки деления, которые возникают при взятии навески из анализируемой пробы. Измельчение должно быть выполнено без изменения свойств анализируемого вещества (см. 7.4).

Корма с высоким содержанием влаги (массовая доля сухих веществ менее 86%) перед измельчением до частиц размером 1,0 мм для анализа стабильных параметров необходимо частично высушить при температуре от 55°С до 60°С (см. 7.5).

Корма, содержащие комки или куски размером более 6 мм, перед делением необходимо измельчить или раздробить до размеров частиц менее (4±2) мм (см. 7.6).

Для некоторых жирных или липких кормов (например, семян масличных культур, кормов для домашних животных, блоков мелассы) рекомендуются процедуры специальной подготовки пробы (см. 7.7).

Далее образцы хранят (см. 7.8).

Подготовка проб, взятых для анализа ближней инфракрасной (NIR) спектрометрией, должна соответствовать подготовке проб для построения градуировки. Данный анализ требует минимальную пробоподготовку или без нее, часто для анализа используют свежие, сухие, крупно нарезанные пробы. Однако при выполнении градуировки может возникнуть необходимость высушить, мелко измельчить, а затем сократить массу, используя делитель, для получения пробы, подходящей для контрольного анализа.

      7.2 Проверка пробы

7.2.1 Общее описание

Лабораторную пробу регистрируют (например, нумеруют).

Перед началом соответствующей процедуры подготовки проб требуется определенная проверка лабораторной пробы.

7.2.2 Контроль состояния пробы

Проба должна поступать в лабораторию без повреждений и, при необходимости, охлажденной или замороженной. Сопроводительные документы содержать полную и доступную информацию о полученной пробе. Нарушения (например, нет информации о типе кормов, нарушена упаковка, сопроводительные документы не соответствуют пробе) фиксируют и сообщают руководителю. Допускается устранение отдельных отмеченных нарушений. Если нарушения исправить невозможно, и замеченный недостаток может повлиять на результат анализа (например, когда масса пробы недостаточна, когда в лабораторной пробе присутствует плесень из-за слишком высокой влажности или из-за недостаточного охлаждения во время транспортировки в лабораторию), запрашивают другую пробу от той же партии.

7.2.3 Идентификация и начальный этап подготовки проб

Лабораторная проба должна быть идентифицирована, т.е. отнесена к определенной группе в соответствии с терминами и определениями категорий кормов (см. 2.3).

На начальных этапах подготовки в лабораторной пробе определяют содержание влаги. Проба с высоким содержанием влаги (массовая доля сухих веществ менее 86%) должна быть подготовлена как можно скорее или храниться при низких температурах, чтобы не допустить порчу.

Для кормов со слишком высоким содержанием влаги (массовая доля сухих веществ менее 86%) вся лабораторная проба перед размолом должна быть нарезана на кусочки размером около 1 см. При необходимости лабораторную пробу уменьшают методом ручного (альтернативного) деления, а затем частично высушивают. Приведенные выше процедуры рекомендуются для стабильных параметров и для анализа микотоксинов. При определении нелетучих компонентов допускается вакуумная сушка при низкой температуре или сублимационная сушка. Для определения нестабильных (летучих) параметров (например, органических кислот, аммиака, синильной кислоты, а также для генетически модифицированных организмов (ГМО) и органических остатков) для микробиологического анализа рекомендуется использовать пробу без предварительной сушки.

Для сухих кормов, состоящих из кусков размером более 6 мм, перед сокращением массы рекомендуется первое грубое измельчение всей пробы (например, с помощью щековой дробилки) до частиц размером от 4 до 6 мм.

7.2.4 Особенности пробоподготовки в зависимости от анализируемых параметров

Количество анализируемых проб зависит от количества параметров, которые будут анализировать.

Для анализа стабильных и нестабильных параметров, а также для микроскопического и микробиологического анализов, должны быть подготовлены отдельные анализируемые пробы. Любая оставшаяся часть лабораторной пробы используется в качестве контрольной (резервной).

В случае анализа стабильных параметров анализируемую пробу измельчают до частиц надлежащих размеров и хранят при комнатной температуре до дальнейшего анализа.

При анализе нестабильных параметров анализируемые пробы хранят при низких температурах и измельчают до частиц соответствующего размера в день анализа для предотвращения порчи.

Для микроскопических и микробиологических анализов важно, чтобы не выполнялось никакое предварительное измельчение. Анализируемые пробы для исследования пробиотиков не должны быть заморожены, только охлаждены до температуры 4°С - 10°С.

Для микотоксинов и анализа ГМО методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), если это возможно, перед сокращением массы вся лабораторная проба, или большая часть оставшейся лабораторной пробы, должна быть измельчена, а затем при необходимости сокращена.

Для анализа стабильных и нестабильных параметров после сокращения массы пробы из групп, перечисленных в таблицах 4 и 5, должны быть измельчены в соответствующих условиях (температура) до необходимого размера частиц, указанных в таблицах 7 и А.1 (приложение А).

Таблица 4 - Рекомендуемые размеры частиц анализируемой пробы для определения стабильных параметров и для микроскопии

Контрольные пробы хранят без измельчения, но если необходимы анализы микотоксинов или ГМО методом ПЦР, то вся лабораторная проба должна быть измельчена до требуемых размеров частиц.

Контрольную пробу хранят (если необходимо, измельчают) в условиях, сохраняющих ее неизменность в течение достаточного периода времени (например, до окончания срока годности пробы).

Таблица 5 - Рекомендуемые размеры частиц анализируемых проб для определения нестабильных параметров (разлагаемых, летучих, термочувствительных, микробиологических)