ГОСТ 27785-88 Препараты биологические сухие. Метод определения кислорода во флаконах с препаратом.

ГОСТ 27785-88

Группа Р39

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

 ПРЕПАРАТЫ БИОЛОГИЧЕСКИЕ СУХИЕ

 Метод определения кислорода во флаконах с препаратом

 Biological dry compounds. Method for determination of oxygen content in bottles of compound

ОКСТУ 9380

     Срок действия с 01.07.89

до 01.07.94*

 ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Государственным агропромышленным комитетом СССР

ИСПОЛНИТЕЛИ

Ю.П.Чернецкий, канд. техн. наук (руководитель темы); Ю.А.Рябков; Ю.Г.Опарин; В.В.Желтов, канд. вет. наук; Е.В.Пронина, канд. хим. наук; Н.В.Алкеев, канд. физ.-мат. наук

2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 26.07.88 N 2751

3. Срок первой проверки - 1995 г.

4. ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

5. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ     

Настоящий стандарт распространяется на сухие биологические препараты, применяемые в ветеринарии, и устанавливает хроматографический метод определения количества кислорода, содержащегося в заполненных азотом и герметично закрытых флаконах с сухими биологическими препаратами.

Сущность метода заключается в отборе пробы газа из флакона с сухим препаратом, вводе ее в хроматограф, получении на хроматограмме двух разделенных пиков кислорода и азота и количественном определении кислорода.

 1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ

1.1. Для проведения испытания из серии готового препарата методом случайного отбора из разных мест берут 3 флакона с сухим препаратом.

1.2. Взятые флаконы проверяют на целостность и герметичность, тщательно осматривая поверхности флаконов с целью выявления трещин, а также проверяя плотность прилегания закатанного колпачка и резиновой пробки. Флаконы с трещинами или дефектами укупоривания для испытания не используют.

 2. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ

Хроматограф газовый марки ЛХМ-8МД или других аналогичных марок с детектором по теплопроводимости и газохроматографической колонкой диаметром 3,0 мм и длиной 1000 мм.

Печь муфельная с температурой нагрева до 1000°С.

Измеритель расхода газа с бюреткой 4-1-50 по ГОСТ 20292-74.

Секундомер СДС-пр-1 по ГОСТ 5072-79.

Шприц медицинский типа "Рекорд" вместимостью 1 см

или микрошприц марки МШМЛб2.793.014 к хроматографу ЛХМ-8МД.

Сетки проволочные тканые с ячейками 0,3-0,5 мм по ГОСТ 6613-86.

Лупа измерительная 10

типа ЛПИ-457 по ГОСТ 25706-83.

Эксикатор диаметром 250 мм по ГОСТ 25336-82.

Ступка фарфоровая.

Линейка металлическая длиной 30 см по ГОСТ 427-75.

Сита молекулярные - цеолит синтетический марки СаА зернением 0,3-0,5 мм.

Игла медицинская 0840 по ГОСТ 25377-82.

Трубка резиновая медицинская внутренним диаметром 4,2

2 мм, длиной 10 м по ГОСТ 3399-76.

Бутыль вместимостью 3000 см

.

Пробка резиновая по ГОСТ 7852-76.

Масло силиконовое.

Гелий.

Азот газообразный особой чистоты по ГОСТ 9293-74.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

 3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ

3.1. Подготовка колонки

Синтетический цеолит измельчают в фарфоровой ступке, отсеивают на ситах порошок дисперсностью 0,3-0,5 мм, промывают его дистиллированной водой для удаления пыли, высушивают и прокаливают в муфельной печи в течение 2 ч при температуре 450-500 °С, затем охлаждают в эксикаторе на сетках до комнатной температуры.

Хроматографическую колонку устанавливают вертикально и засыпают синтетическим цеолитом, уплотняя его вибратором или легким постукиванием снизу. Колонку не досыпают на 1 см и закупоривают сеткой. Заполненную колонку устанавливают в термостате хроматографа и, не присоединяя к детектору, пропускают через нее поток гелия или азота особой чистоты (30-40 см

/мин) в течение 3 ч при температуре 160-180

°

С. Затем колонку присоединяют к детектору и продолжают через нее пропускать гелий или азот, пока не прекратится дрейф нулевой линии при максимальной чувствительности детектора.

3.2. Подготовка хроматографа

Подготовку хроматографа к работе и включение выполняют в соответствии с заводской инструкцией. Режим работы хроматографа осуществляется при следующих параметрах:

Температура колонки	40°С
Температура детектора	60°С
Скорость газа-носителя гелия:
в измерительной колонке	60 см /мин
в колонке сравнения	30 см /мин
Скорость диаграммной ленты	2400 мм/ч
Объем пробы, подаваемой в испаритель:
для шприца "Рекорд"	от 150 до 250 дм
для шприца МШМЛб2.793.014	60 дм

В зависимости от предполагаемой объемной доли кислорода и объема пробы выбирают ток и чувствительность детектора в соответствии с таблицей.

Объемная доля кислорода, %	Объем пробы, дм	Ток детектора, мА	Чувствительность
			Кислород	Азот
Св. 0,05 до 0,5 включ.	60	170±5	1/3	1/100
	150-250	140±2	1/3	1/100
Св. 0,5 до 5,0 включ.	60	170±5	1/10	1/100
	150-250	140± 2	1/10	1/100
Св. 5,0	60	150±5	1/10	1/10
	150-250	110±2	1/10	1/10

При отсутствии данных об объемной доли кислорода во флаконах испытание проводят при максимальной чувствительности детектора.

Готовность хроматографа к анализу и его работоспособность проверяют, используя в качестве газовой пробы атмосферный воздух.

3.3. Подготовка флакона с препаратом к испытанию

Для отбора пробы газа из флакона с препаратом выравнивают давление газа во флаконе с атмосферным давлением. Выравнивание давлений проводят азотом, который подается из баллона через редуктор под давлением 10 КПа (0,1 кгс/см

) по резиновому шлангу в ресивер-бутыль вместимостью не менее 3000 см

, а из него по резиновому шлангу в медицинскую иглу, которой прокалывают резиновую пробку испытуемого флакона. Перед прокалыванием иглой пробки флакона азот пропускают через систему хроматографа в течение 30 мин с целью удаления остатков воздуха в ней и проверяют чистоту выходящего азота на содержание в нем кислорода на хроматографе. Затем перекрывают подачу азота в ресивер и спустя 15 с прокалывают иглой пробку флакона, выравнивая давление в нем с атмосферным. Через 2-3 с иглу из пробки извлекают.

3.4. Подготовка медицинского шприца

3.4.1. Предварительно устанавливают на штоке шприца металлическую трубку диаметром 4 мм, длиной 30 мм для ограничения хода поршня с целью достижения объема под поршнем 150-250 мкл и проверяют шприц на герметичность. Для этого шприц с плотно надетой иглой вкалывают в резиновую пробку, погружают всю иглу с канюлей и наконечником шприца в воду и при легком надавливании на поршень следят за появлением пузырьков воздуха. Если пузырьки воздуха не выходят в месте соединения канюли иглы со шприцем и поршень не подается при нажатии на него, шприц следует считать герметичным для анализа. В целях уплотнения и легкости хода поршня перед его использованием слегка смазывают внутреннюю поверхность цилиндра шприца в нижней его части тонким слоем силиконового масла.

3.4.2. Подготовленным к отбору газа медицинским шприцем с иглой прокалывают резиновую трубку, по которой выходит гелий из колонки сравнения хроматографа, и дважды медленно шприцем набирают и выпускают гелий. В третий раз, набрав гелий в шприц и расположив его иглой вниз, отбирают пробы газа из флакона с препаратом.

 4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ

4.1. Из каждого флакона отбирают две пробы газа и последовательно одну за другой, с интервалом 3-4 мин, вводят в испаритель хроматографа. Для этого прокалывают резиновую пробку флакона, выдавливают гелий из шприца во флакон и спустя 1-2 с набирают под поршень шприца пробу газа. Шприц извлекают из пробки флакона и быстро переносят к испарителю хроматографа в вертикальном положении. Точно по центру канала прокалывают иглой шприца прокладку испарителя и вводят в испаритель хроматографа.

Пробу в испаритель вводят плавным нажатием пальца на шток с таким расчетом, чтобы поршень двигался плавно с одинаковой скоростью для всех вводимых проб. Извлекают иглу шприца из испарителя также плавно, удерживая шприц в вертикальном положении.

Через 110-120 с после ввода пробы на хроматограмме самописец вычерчивает пик кислорода, а затем пик азота. Если какой-либо из пиков не укладывается в размер ширины диаграммной ленты или его размер мал, следует изменить чувствительность хроматографа в соответствии с заводской инструкцией.

Через 20-25 проколов следует заменить резиновую прокладку испарителя на новую.

 5. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ

5.1. Рассчитывают площадь пиков кислорода и азота. Для этого на хроматограмме измеряют высоту и ширину пиков кислорода и азота с помощью металлической линейки длиной 30 см, увеличительной лупы и жесткого острозаточенного карандаша. Высоту пиков измеряют от базовой линии до вершины пика, ширину пика - на половине его высоты. При измерениях берут расстояние от внутренней толщины линии пика до наружной.

Площадь пиков кислорода (

) и азота (

) в квадратных миллиметрах вычисляют по формулам:

;

,

где

,

- высота пиков кислорода и азота, мм;

,

- ширина пиков кислорода и азота, мм.

5.2. Объемную долю кислорода (

) в процентах в каждой пробе газа вычисляют по формуле

,

где

,

- площади пиков кислорода и азота, мм

.

5.3. За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов определений в трех флаконах препарата.

Относительная приведенная погрешность метода при доверительной вероятности Р  = 0,95 не должна превышать 10%.