ГОСТ Р МЭК 60068-2-10-2009 Испытания на воздействие внешних факторов. Часть 2-10. Испытания. Испытание J и руководство: Грибостойкость.
ГОСТ Р МЭК 60068-2-10-2009
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ИСПЫТАНИЯ НА ВОЗДЕЙСТВИЕ ВНЕШНИХ ФАКТОРОВ
Часть 2-10
Испытания. Испытание J и руководство: Грибостойкость
Environmental testing. Part 2-10. Tests. Test J and guidance: Mould growth
ОКС 19.040
Дата введения 2011-01-01
Предисловие
1 ПОДГОТОВЛЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 303 "Изделия электронной техники, материалы и оборудование" на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии стандарта, указанного в пункте 4
2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 303 "Изделия электронной техники, материалы и оборудование"
3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 11 декабря 2009 г. N 719-ст
4 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту МЭК 60068-2-10:2005* "Испытания на воздействие внешних факторов. Часть 2-10. Испытания. Испытание J и руководство: Грибостойкость" (IEC 60068-2-10:2005 "Environmental testing - Part 2-10: Tests - Test J and guidance: Mould growth", IDT).
При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им национальные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА.
5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
6 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Май 2019 г.
Правила применения настоящего стандарта установлены в статье 26 Федерального закона от 29 июня 2015 г. N 162-ФЗ "О стандартизации в Российской Федерации". Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего года) информационном указателе "Национальные стандарты", а официальный текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)
1 Область применения
Настоящий стандарт устанавливает метод определения стойкости изделий к росту плесневых грибов и влияния развития плесневых грибов на рабочую характеристику и другие соответствующие свойства изделия.
Поскольку рост плесневых грибов происходит при высокой относительной влажности, это испытание применимо к изделиям, предназначенным для транспортирования, хранения и использования во влажных условиях не менее двух суток.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
_______________
ISO 846:1997, Plastics - Evaluation of the action of microorganisms (Пластмассы. Оценка действия микроорганизмов)
Инструкция по биологической безопасности в лабораториях, 2-е изд., ВОЗ, 1993, ISBN 92.4 1544503
MIL-STD-810 F:2000 Method 508.5 Fungus (Метод 508.5 Грибы)
3 Общие положения
Данное испытание предусматривает заражение изделий спорами культур плесневых грибов с последующей инкубацией (выдержкой в термостате) в условиях, благоприятных для прорастания спор и роста плесневых грибов.
Приведены два варианта испытания на грибостойкость. Вариант 1 испытания предусматривает заражение образцов спорами плесневых грибов без питательной среды. Вариант 2 предусматривает заражение суспензией спор плесневых грибов с питательным раствором, способствующим росту плесневых грибов.
Для оценки степени защищенности применяемых конструкционных материалов от влияния роста плесневых грибов желательно использовать методики испытания, приведенные в ИСО 846 для пластмасс.
Примечание - Лаборатории по проведению микробиологических испытаний технической продукции должны быть аккредитованы (официально признаны) в соответствии с ИСО/МЭК 17025. Подробности см. в приложении F.
Поверхностные загрязнения образцов пылью, грязью, конденсированными летучими питательными веществами или смазкой могут быть обусловлены хранением, эксплуатацией или транспортированием совместно с теми изделиями, которые уже находились под воздействием среды или транспортировались без защитного покрытия. Эти загрязнения поверхности могут вызывать усиленный рост колоний грибов, что может приводить к повреждению изделия. Последствия воздействия такого загрязнения могут быть оценены проведением испытания по варианту 2.
Из-за трудности поддержания необходимых условий испытания в испытательной камере очень большого объема крупную сборную аппаратуру, как правило, испытывают по секциям (блокам). В любом случае это снижает стоимость испытания, так как несколько секций (блоков) могут быть настолько похожи по конструкции, что достаточно испытать только одну из них.
4 Опасность для здоровья исследователей
Настоящий метод испытания основывается на применении жизнеспособных спор плесневых грибов и создании условий, благоприятных для их развития.
Поэтому прежде чем приступить к каким-либо работам с культурами плесневых грибов или выполнению этапов испытания, необходимо изучить приложения к настоящему стандарту:
Приложение А Опасность для персонала.
Приложение В Методы посева.
Приложение С Рекомендуемые меры безопасности.
Приложение D Методики обеззараживания.
Инструкция по биологической безопасности в лабораториях, 2-е издание, Всемирная организация здравоохранения, 1993, ISBN 92.4 1544503, содержит общие основные положения по безопасности для технических устройств, соприкасающихся с грибами.
5 Варианты испытаний
5.1 Вариант 1 испытания
После инкубационного периода в 28 сут определяют:
- степень роста плесневых грибов внешним осмотром;
- физические дефекты, вызванные ростом плесневых грибов;
- в случае роста плесневых грибов влияние на функциональные и (или) электрические характеристики, если это требуется соответствующими нормативными документами (НД).
Период инкубации следует продлевать до 56 сут, если в соответствующих НД предусмотрены проверка функции и измерение электрических характеристик.
5.2 Вариант 2 испытания
После обработки имитирующими загрязнение питательными веществами, за которой следует инкубационный период в 28 сут, определяют:
- степень роста плесневых грибов внешним осмотром;
- физические дефекты, вызванные ростом плесневых грибов;
- воздействие роста плесневых грибов на функционирование и (или) электрические характеристики, если требуется соответствующими НД.
Сопротивляемость поверхности образца снижается при применении питательных веществ для имитации загрязнения без роста плесневых грибов. Этот эффект необходимо учитывать при контроле функции и (или) измерении электрических характеристик.
Из-за применения питательных веществ происходит рост плесневых грибов; в случае его отсутствия необходимо рассматривать фунгицидное воздействие.
6 Реактивы и материалы
6.1 Культуры или споры. Поставка и условия
При выполнении испытания необходимо использовать плесневые грибы, приведенные в таблице 1. В качестве руководства указан характер ожидаемого воздействия каждого гриба. Споры всех культур, однако, следует использовать совместно в смешанной суспензии независимо от свойств образца.
Культуры или замороженные высушенные споры получают из сбора известных микологических культур и поставляют в контейнерах с нанесенной на них датой посева культуры.
Сертификат должен подтверждать соответствие культуры с грибами и номера штамма указанным в таблице 1 и (или) в приложении Е.
Таблица 1 - Испытательные грибы
|
|
|
|
Наименование | Номер штамма  | Материал | Примечание |
1 Aspergillus niger | АТСС 6275 | Многие материалы | -  |
2 Aspergillus terreus | АТСС 10690 | Пластмассы | - |
3 Chaetomium globosum | АТСС 6205 | Целлюлоза | - |
4 Cormoconic resinae | DSM 1203 | Смазочные материалы на основе углеводорода | - |
5 Paecilomyces variotii | АТСС 18502 | Пластмассы и кожа | - |
6 Penicillium funiculosum | АТСС 36839 | Многие материалы, особенно текстиль | - |
7 Scopulariopsis brevicaulis | АТСС 36840 | Резина | - |
8 Trichoderma virens | АТСС 9645 | Целлюлоза, текстиль и пластмасса | -  |
Также приведены в ИСО 846. Также приведены в таблице 508.5-1 M1L-STD-810 F.* См. также приложение Е. | |||
С культурами и замороженными высушенными спорами следует обращаться и хранить их согласно рекомендациям поставщика и соответствующим требованиям настоящего стандарта. При подготовке культуры в испытательной лаборатории из фонда культур или из замороженных высушенных спор на контейнере с культурой должна быть указана дата посева.
Культуры используют для приготовления испытательной споровой суспензии, если они хорошо спорулированы.
Это достигается в большинстве случаев через 7-14 сут инкубации при температуре (29±1)°С.
Примечание - Поставщик культур или замороженных высушенных спор может рекомендовать другие условия для развития культур.
Если культуры не предназначены для немедленного использования, их следует хранить в холодильнике при температуре от 5°С до 10°С не более шести недель, начиная хранение не раньше чем через 14 сут и не позднее чем через 28 сут с даты посева, указанной на контейнере.
Крышку контейнера не допускается открывать до начала приготовления споровой суспензии. Из открытого контейнера следует приготовлять только одну суспензию.
6.2 Приготовление споровой суспензии
6.2.1 Общие положения
Суспензия должна быть приготовлена в стерилизованной дистиллированной воде, к которой добавлен смачивающий агент в концентрации от 0,005% до 0,01%. Для этой цели подходит агент на основе N-метилтаурида или диоктил-Na-сульфосукцината. Смачивающий агент не должен содержать вещества, способствующие развитию плесневых грибов или подавляющие его.
К каждой культуре необходимо осторожно добавить 10 мл воды, содержащей смачивающий агент.
Стерилизуют платиновую или нихромовую проволоку, нагревая в пламени до красного каления, и дают ей охладиться. Этой проволокой осторожно очищают поверхность культуры, чтобы освободить споры.
Жидкость слегка встряхивают, чтобы отделить споры от фрагментов мицелия, осторожно сливают и профильтровывают суспензию через тонкий слой стерильной стекловаты или через воронку с микрофильтром с порами размером от 40 до 100 мкм в стерилизованную трубку центрифуги.
Отфильтрованную споровую суспензию обрабатывают на центрифуге и сливают всплывшую на поверхность жидкость. Остаток снова разводят в не менее чем 10 мл стерилизованной дистиллированной воды и снова обрабатывают на центрифуге. Споры промывают таким образом три раза.
6.2.2 Подготовка варианта 1 испытания
Помещают получившийся осадок спор каждой культуры в емкость, содержащую:
- раствор минеральных солей в соответствии с 6.3, но без сахарозы, если в соответствии с требованиями НД проводят только внешний осмотр (см. 5.1);
Смешивают одинаковые объемы отдельных суспензий, достаточные для соответствующей методики посева, для получения окончательной суспензии смеси спор, готовой для посева. Споровую суспензию в растворе минеральной соли следует использовать в течение 48 ч после приготовления. Споровую суспензию в стерильной дистиллированной воде следует использовать в течение 6 ч после приготовления.
Примечание - Приготовляют общие объемы около 100 мл для посева распылением или около 500 мл для посева нанесением или погружением.
6.2.3 Подготовка варианта 2 испытания
Смешивают одинаковые объемы отдельных суспензий, достаточные для соответствующей методики посева, чтобы получить окончательную суспензию смеси спор, готовую для посева. Споровую суспензию используют в течение 6 ч после приготовления.
Примечание - См. 6.2.2.
6.3 Контрольные полоски
В качестве контрольных полосок, необходимых для проведения испытания, используют полоски чистой белой фильтровальной бумаги или водонепроницаемой хлопчатобумажной ткани.
Питательный раствор, используемый при приготовлении контрольных полосок, готовят растворением в дистиллированной воде перечисленных ниже реактивов.
|
|
Реактив | г/л |
Калий фосфорнокислый однозамещенный (  ) | 0,7 |
Калий фосфорнокислый двузамещенный (  ) | 0,3 |
Магний сернокислый (  ) | 0,5 |
Натрий азотнокислый (  ) | 2,0 |
Калий хлористый (  ) | 0,5 |
Железо сернокислое (  ) | 0,01 |
Сахароза | 30,0 |
pH должен быть от 6,0 до 6,5 при температуре 20°С. При необходимости его регулируют 0,01 молярным раствором NaOH. Раствор стерилизуют в автоклаве при температуре (120±1)°С в течение 20 мин.
Непосредственно перед посевом (см. 11.2) контрольные полоски помещают в насыщенный питательный раствор, вынимают из него и дают стечь каплям.
7 Описание испытательной аппаратуры
7.1 Заражение распылением
Предпочтительно применять сверхзвуковую аэрозольную установку, используемую в терапии для ингаляций, совместно с камерой для безопасного посева (см. приложение В).
7.2 Инкубация образцов небольших размеров
Следует использовать стеклянные или пластмассовые контейнеры с крышками, имеющими устройства для установки или подвешивания образцов и контрольных полосок.
Контейнер должен быть таких размеров и формы, чтобы получилась открытая поверхность воды, достаточная для поддержания внутри контейнера относительной влажности воздуха выше 90%.
Приспособления для установки или подвешивания должны быть такими, чтобы образцы и контрольные полоски не соприкасались с водой и не забрызгивались ею.
Контейнеры помещают в камеру с равномерной по всему рабочему объему температурой от 28°С до 30°С для инкубации образцов и контрольных полосок. Любое циклическое изменение температуры, обусловленное работой термостата, не должно превышать 1°С/ч.
7.3 Инкубация образцов больших размеров
Для инкубации образцов, слишком больших для контейнеров, указанных в 7.2, используют соответствующую камеру влажности. У камеры влажности должна быть хорошо герметизированная дверь для предотвращения воздухообмена между рабочим объемом камеры и лабораторией.
Относительная влажность воздуха внутри камеры должна быть выше 90%. Не допускается стекание конденсата со стенок или с крышки камеры на образцы и контрольные полоски. В рабочем объеме камеры поддерживают равномерную температуру от 28°С до 30°С. Любое циклическое изменение температуры, обусловленное работой термостата, не должно превышать 1°С/ч.
Для того чтобы установленные влажность и температура поддерживались постоянными во всех точках рабочего объема камеры, допускается принудительная циркуляция воздуха. Скорость потока воздуха над поверхностью образца (образцов) не должна превышать 1 м/с.
8 Степень жесткости
Степень жесткости каждого варианта испытания определяется длительностью инкубации.
Для варианта 1 испытания:
- степень жесткости 1 - 28 сут;
- степень жесткости 2 - 56 сут
в соответствии с требованиями технических условий на изделия конкретных типов.
Для варианта 2 испытания:
- степень жесткости 1 - 28 сут.
9 Первоначальный контроль
Проводят внешний осмотр образцов и проверяют их электрические и механические характеристики по требованиям соответствующих НД.
10 Предварительная выдержка
10.1 Очистка
Испытанию подвергают образцы в состоянии поставки. Как правило, их не подвергают специальной очистке.
Если предусмотрено в соответствующих НД, перед испытанием допускается промывать половину партии образцов этиловым спиртом или деминерализованной водой, содержащей моющее средство, затем промывают деминерализованной водой без моющего средства, а другую половину оставляют в состоянии поставки. Таким образом, любой рост плесневых грибов, вызванный использованием негрибостойких материалов в конструкции изделия, можно отличать от роста плесневых грибов, вызванного загрязнением его поверхности.
Если считают, что степень развития плесневых грибов 0 баллов (вариант 1 испытания), рассматривают необходимость очистки образцов перед испытанием, так как наличие загрязнения может способствовать росту грибов.
Примечание - Определение степени развития плесневых грибов приведено в 12.3.
10.2 Хранение во влажном тепле
Образец (образцы) непосредственно перед посевом следует хранить в условиях инкубации не менее 4 ч при температуре (29±1)°С и относительной влажности выше 90% и ниже 100%.
11 Выдержка
11.1 Применение
Применение варианта испытания, установленного в НД, осуществляют в соответствии с представленным ниже методом.
11.1.1 Вариант 1 испытания
Если в соответствии с НД требуется проводить контроль функционирования и измерение электрических характеристик, следует использовать две группы образцов.
Группа 1. Образцы заражают споровой суспензией и инкубируют.
Группа 2. Отрицательные контрольные образцы обрызгивают дистиллированной водой, или наносят на них дистиллированную воду, или погружают в нее в соответствии с методом посева, используемым для группы 1, и хранят при температуре и относительной влажности, требуемой для инкубации, в стерильной среде.
Если в НД отсутствуют требования к контролю функционирования и измерению электрических характеристик, следует использовать только группу 1.
11.1.2 Вариант 2 испытания
Должно быть две группы образцов.
Группа 1. Образцы обрабатывают суспензией спор в питательном растворе и инкубируют.
Группа 2. В соответствии с группой 2 варианта 1 испытания.
Примечание - Отрицательные контрольные образцы испытывают при заданных условиях выдержки в отдельной камере без образцов, зараженных суспензией спор грибов. Для исключения всякого роста плесневых грибов на отрицательных контрольных образцах камера должна быть стерилизована одним из методов, приведенных в D.1.1 (приложение D). Результат испытания считают действительным, если плесневые грибы не развиваются как на испытуемых, так и на отрицательных контрольных образцах.
11.2 Заражение
Заражение испытательных образцов и контрольных полосок (см. 6.3) споровой суспензией (см. 6.2) следует осуществлять распылением, если в соответствующих НД не оговорено иное.
Если распыление не подходит из-за размеров, конструкции или других характеристик образца, допускается проводить заражение споровой суспензией погружением или нанесением, как указано в соответствующих НД.
Примечание - При распылении аэрозоля или споровой суспензии с помощью сверхзвуковой аэрозольной установки в камере для безопасного посева (см. приложение В) получается очень равномерное распределение спор по испытуемой поверхности, что приводит к высокой воспроизводимости результатов испытания. Этот способ должен быть предпочтительным.
11.3 Инкубация
Инкубацию проводят при температуре (29±1)°С и относительной влажности более 90% и менее 100%. Эти условия поддерживают для образцов небольших размеров в контейнере, а для образцов больших размеров - в камере влажности для инкубации (см. 7.3).
Сразу же после заражения образцы небольших размеров и не менее трех контрольных полосок помещают в контейнер на достаточном расстоянии друг от друга и без ограничения требуемой относительной влажности. После этого контейнер помещают в инкубационную камеру.
В случаях, когда это возможно, отрицательные контрольные образцы размещают в таких же контейнерах, как для зараженных образцов, без контрольных полосок, но стерилизованных. Затем эти контейнеры помещают в инкубационную камеру.
Для образцов больших размеров в камеру с образцами помещают соответствующее число контрольных полосок. Все отрицательные контрольные образцы располагают в отдельной заново стерилизованной камере (см. приложение D), используемой предпочтительно только для отрицательных контрольных образцов.
Контейнеры и камеру влажности следует открывать только для:
- обследования контрольных полосок после 7 сут, обращая внимание на состояние спор и поддержание условий инкубации;
- подачи в контейнеры кислорода один раз в каждые 7 сут до полного завершения предписываемой длительности инкубации;
- выполнения промежуточного контроля внешнего вида в соответствии с 12.3.
Открывание должно занимать только несколько минут.
После 7 сут инкубации должен быть виден невооруженным глазом рост плесневых грибов более чем у одного штамма на каждой контрольной полоске. В противном случае испытание считают недействительным и его следует возобновлять. В этом случае можно использовать те же самые образцы.
Любые перерывы инкубации допускаются только для внешнего осмотра не более чем на 10 мин в каждом случае, а также если это требуется соответствующими НД. Во время инкубации должно быть предписано проведение не более двух внешних осмотров. Длительность внешнего осмотра устанавливают в соответствующих НД.
12 Заключительный контроль
12.1 Внешний осмотр
Сразу же после изъятия из контейнера или из камеры влажности образцы подвергают осмотру (см. 12.3), измерениям и фотографированию (если требуется в технических условиях на изделия конкретного типа), так как внешний вид плесневых грибов может изменяться при высыхании. Рекомендуемые меры безопасности при проведении испытаний приведены в приложении С.
После внешнего осмотра и определения фактического роста плесневых грибов следует тщательно удалять мицелий 70%-ным (объемная доля) раствором этилового спирта с поверхности, которую затем осматривают под микроскопом, чтобы оценить характер и степень любого воздействия (например, травление) на образец. Рекомендуемые меры безопасности при удалении роста плесневых грибов приведены в приложении С.
12.2 Воздействие плесневых грибов
Если в соответствии с НД предусмотрен контроль электрических и (или) механических параметров в условиях влажности (после инкубации), то необходимо, чтобы относительная влажность среды, окружающей образцы, чрезмерно не изменялась, пока не проведен данный контроль. Поэтому контроль для образцов небольших размеров следует проводить при их нахождении в контейнере с закрытой крышкой и без воды. Для образцов больших размеров контроль проводят, пока они находятся в камере влажности.
Примечание - В случае проведения работ с образцами под электрической нагрузкой или при открытых крышках контейнеров и дверцах камер влажности персонал должен соблюдать надлежащие меры безопасности.
Рекомендуемые меры безопасности при проведении испытаний приведены в приложении С. При проведении операции в условиях влажного тепла следует соблюдать требования изготовителя, изложенные в инструкции.
Для получения доступа к полной версии без ограничений вы можете выбрать подходящий тариф или активировать демо-доступ.