ГОСТ 32257-2013 Молоко и молочная продукция. Метод определения нитратов и нитритов.

ГОСТ 32257-2013

 МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

 МОЛОКО И МОЛОЧНАЯ ПРОДУКЦИЯ

 Метод определения нитратов и нитритов

 Milk and milk products. Method for determination of nitrate and nitrite contents

МКС 67.100.10

Дата введения 2015-07-01

 Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Государственным научным учреждением "Всероссийский научно-исследовательский институт молочной промышленности Российской академии сельскохозяйственных наук" (ГНУ "ВНИМИ Россельхозакадемии")

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 14 ноября 2013 г. N 44)

За принятие стандарта проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 22 ноября 2013 г. N 1915-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 32257-2013 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2015 г.

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

6 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Ноябрь 2019 г.

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.

В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"

      1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на молоко и молочную продукцию и устанавливает колориметрический метод определения массовой доли нитратов и нитритов.

Диапазон определения нитратов составляет от 0,5 до 100,0 млн

(от 0,5 до 100,0 мг/кг).

Диапазон определения нитритов составляет от 0,02 до 10,0 млн

(от 0,02 до 10,0 мг/кг).

Настоящий стандарт не распространяется на сыры и сырные продукты.

      2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 12.1.004 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.005 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

ГОСТ 12.4.009 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 12.4.021 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ 61 Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия

ГОСТ 1770 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 3118 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия

ГОСТ 3760 Реактивы. Аммиак водный. Технические условия

ГОСТ 4207 Реактивы. Калий железистосинеродистый 3-водный. Технические условия

ГОСТ 4174 Реактивы. Цинк сернокислый 7-водный. Технические условия

ГОСТ 4197 Реактивы. Натрий азотистокислый. Технические условия

ГОСТ 4199 Реактивы. Натрий тетраборнокислый 10-водный. Технические условия

ГОСТ 4328 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 4456 Реактивы. Кадмий сернокислый. Технические условия

ГОСТ 5821 Реактивы. Кислота сульфаниловая. Технические условия

ГОСТ 5823 Реактивы. Цинк уксуснокислый 2-водный. Технические условия

ГОСТ 6709 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 8682 Посуда лабораторная стеклянная. Шлифы конические взаимозаменяемые

ГОСТ 10652 Реактивы. Соль динатриевая этилендиамин-N, N, N’, N’-тетрауксусной кислоты 2-водная (трилон Б). Технические условия

ГОСТ 12026 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 25336 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 26809.1 Молоко и молочные продукты. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу. Часть 1. Молоко, молочные составные и молокосодержащие продукты

ГОСТ 29227 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

ГОСТ 29251 (ИСО 385-1-84) Посуда лабораторная стеклянная. Бюретки. Часть 1. Общие требования

ГОСТ ИСО 5725-1-2003

Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения

________________

В Российской Федерации действует также ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения".

ГОСТ ИСО 5725-6-2003

Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

________________

В Российской Федерации действует также ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике".

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов и классификаторов на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (www.easc.by) или по указателям национальных стандартов, издаваемым в государствах, указанных в предисловии, или на официальных сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации. Если на документ дана недатированная ссылка, то следует использовать документ, действующий на текущий момент, с учетом всех внесенных в него изменений. Если заменен ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, то следует использовать указанную версию этого документа. Если после принятия настоящего стандарта в ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение применяется без учета данного изменения. Если ссылочный документ отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

      3 Сущность метода

Метод основан на экстрагировании нитратов и нитритов из продукта, очистке экстракта, восстановлении нитратов до нитритов в кадмиевой колонке с последующим фотометрическим определением интенсивности окраски азосоединения, образующегося при взаимодействии нитритов с ароматическими аминами.

      4 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда и реактивы

Весы по нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт, с пределами допускаемой абсолютной погрешности ±0,01 г.

Весы по нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт, с пределами допускаемой абсолютной погрешности ±0,0001 г.

Колориметр фотоэлектрический со спектральным диапазоном измерения от 315 до 980 нм, пределом допускаемого значения основной абсолютной погрешности при измерении коэффициента пропускания не более +1%, с кварцевыми кюветами длиной оптического пути 10 и 20 мм.

Спектрофотометр для измерения оптической плотности длиной волны 538 нм с кварцевыми кюветами длиной оптического пути 10 и 20 мм.

Анализатор потенциометрический с диапазоном измерения от 1 до 14 рН, погрешностью ±0,05 рН.

Колонка кадмиевая для восстановления нитратов, состоящая из: стеклянной колонки с краном; резервуара вместимостью 50 см

с оттянутым капилляром (внутренний диаметр - 1-1,5 мм); изогнутой стеклянной трубки с внутренним диаметром примерно 3 мм; резиновой соединительной трубки (приложение А, рисунок А.1).

Гомогенизатор роторный с четырехлопастным ножом, угловой скоростью вращения ножей 1000-10000 мин

, включающего емкость вместимостью 1,0 дм

.

Мешалка магнитная.

Шкаф сушильный лабораторный, обеспечивающий поддержание температуры от 105°С до 200°С с точностью до 2°С.

Баня водяная термостатируемая.

Бюретки 1-1(2)-2-10-0,02 по ГОСТ 29251.

Колбы мерные 1-10-2, 1-50-2, 1-100-2, 1-250-2, 1-500-2, 1-1000-2 по ГОСТ 1770.

Пипетки 1-1-2-1, 1-1-2-2, 1-1-2-5, 1-1-2-10, 1-1-2-25 по ГОСТ 29227.

Цилиндр 1(3)-10-2, 1(3)-25-2, 1(3)-50-2, 1(3)-100-2, 1(3)-500-2, 1(3)-1000-2 по ГОСТ 1770.

Колбы Кн-1-250-29/32, 1-500-29/32 ТС по ГОСТ 25336.

Стакан В-1-50, В-1-250, В-1-600, В-1-1000 ТС по ГОСТ 25336.

Воронка В-36-80 ХС по ГОСТ 25336.

Эксикатор 2-190 по ГОСТ 25336.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Аммиак водный по ГОСТ 3760 плотностью 0,91 г/см

, ч.д.а.

Медь сернокислая по ГОСТ 4165, ч.д.а.

Динатриевая соль этилендиамин-N,N,N’,N’-тетрауксусной кислоты, 2-водная (Трилон Б) по ГОСТ 10652, ч.д.а.

Кадмий сернокислый по ГОСТ 4456, ч.д.а., раствор массовой концентрации 40 г/дм

.

Калий азотнокислый по ГОСТ 4217, х.ч., предварительно перекристаллизованный из воды и высушенный при 115°С до постоянной массы.

Калий железистосинеродистый по ГОСТ 4207, ч.д.а.

Кислота соляная по ГОСТ 3118 плотностью 1,19 см

, ч.д.а, растворы

(HCI)=0,1 моль/дм

и

(HCI)=2 моль/дм

; водный раствор в соотношении 1:1 по объему.

Кислота уксусная ледяная по ГОСТ 61, ч.д.а., раствор с объемной долей 15%.

Натрий азотистокислый по ГОСТ 4197, х.ч., предварительно перекристаллизованный из воды и высушенный при 115°С до постоянной массы.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, ч.д.а., раствор

(NaOH)=1 моль/дм

.

Натрий тетраборнокислый по ГОСТ 4199, ч.д.а.

Цинк сернокислый 7-водный по ГОСТ 4174, ч.д.а., раствор массовой концентрации 535 г/дм

.

Цинк уксуснокислый по ГОСТ 5823, ч.д.а.

Сульфаниламид (белый стрептоцид) по нормативным и техническим документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.

N-(1-нафтил) этилендиамин дигидрохлорид (НЭДА) или реактив Грисса, ч.д.а., раствор массовой концентрации 30 г/дм

в растворе уксусной кислоты с объемной долей 15%, или раствор реактива Грисса, приготовленный из: кислоты сульфаниловой по ГОСТ 5821, ч. и 1-нафтиламина гидрохлорида, ч.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Допускается применение других средств измерений, вспомогательного оборудования, не уступающих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающим необходимую точность измерения, а также реактивов и материалов по качеству не хуже вышеуказанных.

      5 Отбор проб

Отбор проб проводят по ГОСТ 26809.1.

В случае, если определение не может быть проведено сразу после отбора проб, их хранят в холодильнике при температуре (4±2)°С не более суток.

      6 Подготовка к проведению измерений

6.1 Подготовка продуктов для анализа

6.1.1 Подготовка проб проводится по ГОСТ 26809.

6.1.2 Продукты без пищевкусовых добавок или содержащие пищевкусовые добавки, образующие с продуктом однородную структуру (кофе, какао, фян и т.д.), или неотделяемые пищевкусовые компоненты (кокосовую стружку, дробленые орехи и т.д.), максимально полно освобождают от упаковки, помещают в стакан вместимостью 500 см

и нагревают на водяной бане до температуры (32±2)°С, тщательно перемешивая шпателем до получения однородной массы, не допуская разжижения продукта и освобождаясь от воздушных пузырьков. После чего продукт помещают в стакан гомогенизатора и гомогенизируют в течение 3-5 мин при частоте вращения ножей от 2000 до 5000 мин

до получения однородной массы. Затем образец охлаждают до температуры (20±2)°С.

Во избежание расслоения пробу для анализа отбирают сразу же после гомогенизации.

6.1.3 Продукты с отделяемыми пищевкусовыми компонентами и декорированные (орехи, печенье, вафли в виде декора, глазурь, начинки в виде стержня и другие отделяемые компоненты) максимально полно освобождают от наполнителей, глазури и декора, и далее - как указано в 6.1.2.

6.2 Подготовка к проведению измерений

6.2.1 Приготовление реактива Карреза - 1

В мерную колбу вместимостью 1000 см

помещают (106,00±0,01) г железистосинеродистого калия, растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки.

Раствор хранят не более 1 месяца при температуре (20±5)°С в бутыли из темного стекла.

6.2.2 Приготовление реактива Карреза - 2

В мерную колбу вместимостью 1000 см

помещают (220,00±0,01) г уксуснокислого цинка, растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды в смеси с 30 см

ледяной уксусной кислоты и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки.

Раствор хранят не более 1 месяца при температуре (20±5)°С в бутыли из темного стекла.

6.2.3 Приготовление насыщенного раствора буры

(50,00±0,01) г тетраборнокислого натрия растворяют в 1000 см

горячей дистиллированной воды и охлаждают до комнатной температуры.

Раствор хранят не более 3 месяцев при температуре (20±5)°С.

6.2.4 Приготовление аммиачного буферного раствора рН 9,6-9,7

В мерную колбу вместимостью 1000 см

помещают 500 см

дистиллированной воды, аккуратно добавляют 50 см

концентрированной соляной кислоты и перемешивают. Затем добавляют (10,00±0,01) г трилона Б и 135 см

концентрированного аммиака, аккуратно перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки. Проверяют значение рН (потенциометрически) и при необходимости доводят до рН 9,6-9,7.

Раствор хранят не более 1 месяца при температуре (20±5)°С.

6.2.5 Приготовление растворов азотнокислого калия (для проверки восстановительной способности кадмиевой колонки)

6.2.5.1 Приготовление основного раствора азотнокислого калия, содержащего 1 мг нитрат-иона в 1 см

1,6308 г азотнокислого калия вносят в мерную колбу вместимостью 1000 см

, растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки.

Раствор хранят не более 6 мес при температуре (4±2)°С в бутыли из темного стекла.

6.2.5.2 Приготовление рабочего раствора азотнокислого калия, содержащего 10 мкг нитрат-иона в 1 см

В мерную колбу вместимостью 1000 см

пипеткой вносят 10 см

основного раствора азотнокислого калия (6.2.5.1), растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки.

Раствор неустойчив, готовится в день проведения анализа.

6.2.6 Приготовление раствора азотистокислого натрия (для подготовки градуировочного графика)

6.2.6.1 Приготовление основного раствора азотистокислого натрия, содержащего 0,2 мг нитрит-иона в 1 см

В мерную колбу вместимостью 1000 см

помещают (0,300±0,001) г азотистокислого натрия, растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки.

Раствор хранят не более 7 дней при температуре (4±2)°С в бутыли из темного стекла.

6.2.6.2 Приготовление рабочего раствора азотистокислого натрия, содержащего 2 мкг нитрит-иона в 1 см

В мерную колбу вместимостью 1000 см

пипеткой вносят 10 см

основного раствора азотистокислого натрия (6.2.6.1), растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки.

Раствор неустойчив, готовится в день проведения анализа.

6.2.7 Приготовление раствора сернокислого кадмия массовой концентрацией 40 г/дм

В мерную колбу вместимостью 1000 см

вносят (40,00±0,01) г сульфата кадмия, растворяют в воде и доводят объем дистиллированной водой до метки.

Раствор хранят не более 30 дней при температуре (20±2)°С в бутыли из темного стекла.

6.2.8 Приготовление раствора сернокислого цинка массовой концентрацией 535 г/дм

В мерную колбу вместимостью 1000 см

вносят (535,00±0,01) г сернокислого цинка, растворяют в воде и доводят объем дистиллированной водой до метки

Раствор хранят не более 90 дней при температуре (20±2)°С в бутыли из темного стекла.

6.2.9 Приготовление раствора гидроокиси натрия с молярной концентрацией

(NaOH)=1 моль/дм

В мерную колбу вместимостью 1000 см

помещают (40,000±0,001) г гидроокиси натрия и растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки. При необходимости коэффициент поправки определяют в соответствии с требованиями ГОСТ 25794.1.

Допускается приготовление раствора из фиксанала.

Раствор хранят не более 30 дней при температуре (20±2)°С.

6.2.10 Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрацией

(HCL)=2 моль/дм

В мерную колбу вместимостью 1000 см

вносят 200 см

дистиллированной воды, приливают 160 см

концентрированной соляной кислоты и доводят объем дистиллированной водой до метки.

Раствор хранят не более 30 дней при температуре (20±2)°С в бутыли из темного стекла.

6.2.11 Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрацией

(HCL)=0,1 моль/дм

В мерную колбу вместимостью 1000 см

вносят 50 см

соляной кислоты по 6.2.10 и доводят объем дистиллированной водой до метки.

Допускается приготовление раствора из фиксанала.

Раствор хранят не более 30 дней при температуре (20±2)°С в бутыли из темного стекла.

6.2.12 Приготовление растворов для проведения цветной реакции

6.2.12.1 Приготовление раствора сульфаниламида

В мерную колбу вместимостью 1000 см

помещают (2,000±0,001) г сульфаниламида, растворяют в 400 см

раствора соляной кислоты (водный раствор в соотношении 1:1 по объему) и тщательно перемешивают. Затем доводят данным раствором соляной кислоты до метки.

Раствор хранят не более 1 месяца при температуре (20±5)°С.

6.2.12.2 Приготовление реактива НЭДА

В мерную колбу вместимостью 100 см

помещают (0,100±0,001) г N-(1-нафтил) этилендиамина дигидрохлорида, растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки.

Раствор хранят не более двух недель при температуре (6±2)°С.

6.2.13 Приготовление реактива Грисса

6.2.13.1 Растворяют 2,10 г сульфаниловой кислоты в 250 см

раствора уксусной кислоты при нагревании на кипящей водяной бане.

6.2.13.2 Растворяют 0,5210 г 1-нафтиламина гидрохлорида в 30 см

воды при нагревании на кипящей водяной бане. Раствор еще горячим выливают в 200 см

раствора уксусной кислоты.

6.2.13.3 Объединяют растворы, приготовленные по 6.2.13.1 и 6.2.13.2, в мерной колбе вместимостью 500 см

. Объем раствора доводят раствором уксусной кислоты до метки, перемешивают и, если необходимо, фильтруют (реактив Грисса).

Реактив готовят не позднее, чем за день до использования. Раствор хранят не более двух недель при температуре (6±2)°С в бутыли из темного стекла.

6.3 Приготовление пористого кадмия

6.3.1 Цинковые гранулы (250-300 шт.) распределяют по дну кристаллизатора и заливают 1000 см

раствора сернокислого кадмия массовой концентрацией 40 г/дм

. Через 24 ч кристаллы кадмия, образовавшиеся на поверхности цинковых гранул, отделяют от цинка пинцетом, помещают в стакан с дистиллированной водой и промывают двумя порциями дистиллированной воды по 1 дм

.

Воду сливают, в стакан с кадмием добавляют 200-400 см

раствора соляной кислоты молярной концентрации

(HCI)=0,1 моль/дм

и переносят в гомогенизатор или измельчитель, измельчают 10 с (до диаметра частиц кадмия 0,3-0,8 мм). Измельченный кадмий вместе с раствором соляной кислоты переносят в химический стакан, несколько раз перемешивают стеклянной палочкой и оставляют на ночь под слоем раствора соляной кислоты, после чего перемешивают еще раз, чтобы удалить пузырьки газа из кадмия. Сливают раствор и сразу же промывают кадмий двумя порциями дистиллированной воды по 1 дм

до нейтральной реакции (рН 7,0).

6.3.2 В колбу с подготовленными гранулами кадмия добавляют 100-150 см

раствора сернокислой меди, вращательными движениями перемешивают содержимое в течение 1 мин. Декантируют раствор сульфата меди и промывают водой несколько раз, следя за тем, чтобы кадмий постоянно был покрыт водой.

Кадмий хранят под слоем дистиллированной воды.

6.4 Подготовка кадмиевой колонки

Собирают установку по рисунку А.1 приложения А. На дно стеклянной колонки помещают тонкий слой стеклянной ваты, колонку заполняют дистиллированной водой и вносят суспензию омедненного кадмия по 6.3 фарфоровой ложкой на высоту 13-15 см. При заполнении колонки дают воде периодически стекать, следя, чтобы уровень воды не опускался ниже поверхности слоя кадмия. Поверхность кадмия в колонке должна быть всегда покрыта жидкостью.

6.5 Проверка восстановительной способности кадмиевой колонки

Восстановительную способность кадмиевой колонки проверяют каждый раз перед проведением анализов.

6.5.1 При закрытом кране в резервуар колонки пипеткой вносят 20 см

рабочего раствора азотнокислого калия (6.2.5.2) и 5 см

аммиачного буферного раствора (6.2.4). Устанавливают скорость элюации 3-5 см

/мин и собирают элюат в мерную колбу вместимостью 100 см

. Когда резервуар опустеет, стенки его дважды омывают дистиллированной водой порциями по 15 см

и воду также пропускают через слой кадмия. Собирают около 100 см

элюата, доводят объем до метки водой и перемешивают.

6.5.2 Проводят контрольное определение, повторяя операцию, как указано в 6.5.1, используя 20 см

дистиллированной воды вместо раствора азотнокислого калия.

6.5.3 В две мерные колбы вместимостью 50 см

вносят пипеткой в одну 10 см

испытуемого элюата (6.5.1), в другую 10 см

контрольного (6.5.2) элюата и далее проводят определение нитритов, как указано в 6.7.1, с реактивом НЭДА либо по 6.7.2 - с реактивом Грисса.

Если содержание нитрит-иона, найденного по градуировочному графику, менее 0,27 мкг в 1 см

измеряемого раствора (менее 90% расчетного значения), колонку переподготавливают. Для этого из колонки пористый кадмий переносят в стакан, содержащий раствор соляной кислоты молярной кислоты

(HCI)=2 моль/дм

, выдерживают 10 мин, промывают несколько раз дистиллированной водой, заполняют колонку, как указано в 6.4, и снова определяют восстановительную способность кадмиевой колонки по 6.6.

6.6 Регенерирование кадмиевой колонки

До и после проведения измерений, а также при снижении ее восстановительной способности кадмиевую колонку промывают последовательно 25 см

раствора соляной кислоты молярной концентрации

(HCI)=0,1 моль/дм

, 50 см

дистиллированной воды и 25 см

аммиачного буферного раствора, разбавленного дистиллированной водой в 10 раз. Уровень жидкости всегда должен быть выше слоя кадмия. Между анализами колонку с кадмием заполняют дистиллированной водой.

6.7 Построение градуировочного графика

В шесть мерных колб вместимостью 100 см

пипеткой вносят 0, 1, 5, 10, 15 и 20 см

рабочего раствора азотистокислого натрия (6.2.6.2).

Для получения окраски используют либо реактив НЭДА и сульфаниламид либо реактив Грисса.

6.7.1 Проведение реакции с реактивом НЭДА

В каждую колбу добавляют дистиллированной воды примерно до 30 см

, пипеткой вносят 5 см

раствора сульфаниламида (6.2.7), перемешивают и оставляют при комнатной температуре в темноте на 5 мин. Затем добавляют пипеткой 1 см

раствора НЭДА (6.2.7), доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают, выдерживают в темноте при комнатной температуре 10 мин.

После выдержки измеряют оптическую плотность растворов на спектрофотометре при длине волны 538 нм или на фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром. Контролем служит раствор, не содержащий нитритов.

6.7.2 Проведение реакции с реактивом Грисса

В каждую колбу вносят пипеткой 10 см

реактива Грисса (6.2.13.3), доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают и выдерживают в темноте в течение 25 мин. После выдержки (не более 1 ч) измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 538 нм или на фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром. Контролем служит раствор, не содержащий нитритов.

6.7.3 По полученным данным строят градуировочный график в системе координат: по оси абсцисс - концентрация нитрит-иона, мкг/см

(по 6.7), по оси ординат - соответствующие значения оптической плотности.

      7 Условия проведения измерений

При выполнении измерений в лаборатории должны соблюдаться следующие условия:

      8 Проведение измерений

8.1 В зависимости от предполагаемого содержания нитратов в продукте выбирают массу навески анализируемого продукта, объем фильтратов и элюатов, используемых по ходу анализа, согласно таблице 1.

Таблица 1

Предполагаемое содержание нитратов, мг/кг	Масса анализируемой пробы, г	Объем фильтрата для восстановления нитратов на колонке, см	Объем элюата для  цветной реакции, см
0,02-0,50	20	20	20
0,5-2,5	20	20	10
2,5-25,0	10	10	10
25,0-100,0	10	10	5

Навески проб сухих продуктов уменьшают в четыре раза по сравнению с указанными в таблице 1.

8.1.1 Навеску исследуемого продукта, взятую в химический стакан, количественно переносят с помощью 100 см

теплой дистиллированной воды (около 60°С) в мерную колбу вместимостью 250 см

, добавляют 5 см

раствора буры и 20 см

буферного раствора, перемешивают, затем добавляют последовательно по 5 см

раствора Карреза - 1 и Карреза - 2, встряхивая после каждого добавления. Выдерживают 15 мин на водяной бане при температуре 60°С. Охлаждают, доводят объем раствора до метки дистиллированной водой, фильтруют.

При получении мутного фильтрата в качестве осадителей можно использовать 5 см

раствора сернокислого цинка и 5-10 см

раствора гидроокиси натрия или при повторении экстракции применять большее количество осаждающих реактивов и контролировать рН. Значение рН должно быть более 9,0.

Фильтрат используют для определения нитритов по 8.2 и нитратов по 8.3.

8.1.2 Готовят контрольный раствор на реактивы, как указано в 8.1.1, но вместо пробы продукта добавляют дистиллированную воду.

8.2. Определение нитритов

8.2.1 В две мерные колбы вместимостью 50 см

вносят соответственно 20 см

фильтрата по 8.1.1 и 20 см

контрольного раствора по 8.1.2 и проводят цветную реакцию либо с реактивом НЭДА, как указано в 6.7.1, либо с реактивом Грисса, как указано в 6.7.2. Измеряют оптическую плотность раствора по отношению к контрольному, как указано в 6.7.1 или 6.7.2.

Примечание - В случае получения интенсивно окрашенных фильтратов из продуктов, содержащих антоциановые пигменты (фруктовый йогурт и т.д.), при фотометрировании вместо раствора по 8.1.2 в качестве контрольного используют раствор, который готовят следующим образом: к 20 см

фильтрата по 8.1.1 добавляют 5 см

раствора сульфаниламида по 8.2.7 (при использовании в анализе реактива НЭДА) или 5 см

раствора сульфаниловой кислоты по 6.2.13.1 (при использовании в анализе реактива Грисса), доводят объем до 50 см

и перемешивают.

По найденному значению оптической плотности с помощью градуировочного графика определяют массовую концентрацию нитритов в микрограммах в 1 см

измеряемого раствора (

).

8.2.2. В химический стакан вносят 10 или 20 см

фильтрата (8.1.1) и 5 см

буферного раствора, смесь переносят в сборник колонки и пропускают через слой кадмия. Элюат из колонки собирают в мерную колбу вместимостью 100 см

. Стакан и резервуар омывают двумя порциями дистиллированной воды по 15 см

и воду также пропускают через слой кадмия. Затем заполняют резервуар дистиллированной водой и продолжают элюирование. Устанавливают скорость элюирования 3-5 см

/мин. Собирают около 100 см

элюата, доводят объем до метки дистиллированной водой и перемешивают (испытуемый элюат).

8.2.2.1 Для получения контрольного элюата вместо фильтрата через кадмиевую колонку пропускают контрольный раствор, приготовленный по 8.1.2.

8.2.2.2 В две мерные колбы вместимостью 50 см

каждая вносят: в одну - 5-20 см

испытуемого элюата, в другую - такой же объем контрольного элюата и проводят определение либо с реактивом НЭДА, как указано в 6.7.1, либо с реактивом Грисса, как указано в 6.7.2. По найденной оптической плотности раствора с помощью градуировочного графика определяют массовую концентрацию нитритов в микрограммах в 1 см

измеряемого раствора (

с

).

8.3 Пробу анализируют два раза в условиях повторяемости в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-1-2003* (подраздел 3.14).

      9 Обработка результатов измерений

9 Массовую долю нитратов в продукте

, мг/кг, (в пересчете на нитрат-ион) вычисляют по формуле

,                                               (1)

где 1,348 - коэффициент пересчета нитритов в нитраты, равный отношению молекулярной массы нитрат-иона

(NO

) к молекулярной массе нитрит-иона

(NO

);

- коэффициент, учитывающий влияние матрицы молочного продукта при определении нитратов (таблица 2);

- массовая концентрация нитрит-иона, найденная по градуировочному графику, мкг/см

(8.2.2.3);

- общий объем экстракта, см

(

=250 см

);

- общий объем колориметрируемого раствора, см

(

=50 см

);

- общий объем элюата, см

(

=100 см

);

- массовая концентрация нитрит-иона, найденная по градуировочному графику, мкг/см

(8.2.1);

- масса пробы продукта, взятого на анализ, г;

- объем фильтрата, взятого на колонку для восстановления, см

(8.2.2);

- объем элюата, взятого на цветную реакцию, см

(8.2.2.3);

- объем фильтрата, взятого для цветной реакции, см

(8.2.1);

- коэффициент, учитывающий влияние матрицы молочного продукта при определении нитритов (таблица 2).

За окончательный результат принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных измерений, округленное до первого десятичного знака.

Таблица 2

Наименование продукта
Молоко сырое, питьевое	1,09	1,06
Сливки	1,05	1,07
Кефир	0,95	1,05
Простокваша	1,00	1,00
Ряженка	0,87	0,99
Сметана	1,00	1,09
Творог	1,00	0,93
Творожные изделия	0,83	0,93
Мороженое	1,00	0,99
Сухое молоко	1,08	1,05
Сгущенное молоко	0,99	1,05

      10 Контроль точности результатов измерений

10.1 Метрологические характеристики метода определения содержания нитратов и нитритов

Приписанные характеристики погрешности и ее составляющих метода определения содержания нитратов и нитритов при

=0,95 приведены в таблице 3.

Таблица 3

Диапазон измерений массовой доли нитратов, млн (мг/кг)	Предел повторяемости, , %	Предел воспроизводимости , %	Границы, относительной погрешности ± , %
От 0,5 до 100,0 включ.	15	25	18

10.2 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости

Проверку приемлемости результатов определения массовой доли нитратов в исследуемых продуктах, полученных в условиях повторяемости (два параллельных определения,

=2), проводят с учетом требований ГОСТ ИСО 5725-6.

Результаты измерений считаются приемлемыми при условии

,

где

,

- значения двух параллельных определений массовой доли нитратов в исследуемых продуктах, полученные в условиях повторяемости, млн

(мг/кг);

- среднеарифметическое значение двух параллельных измерений массовой доли нитратов, млн

 (мг/кг);

- предел повторяемости (сходимости), значение которого приведено в таблице 3, %.

Если данное условие не выполняется, то проводят повторные измерения и проверку приемлемости результатов измерений в условиях повторяемости в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО 5725-6.

10.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости

Проверку приемлемости результатов измерений массовой доли нитратов, полученных в условиях воспроизводимости (в двух лабораториях,

=2), проводят с учетом требований ГОСТ ИСО 5725-6.

Результаты измерений, выполненные в условиях воспроизводимости, считаются приемлемыми при условии

,

где

,

- результаты измерений массовой доли нитратов, полученные в двух лабораториях в условиях воспроизводимости, млн

(мг/кг);

- пределы воспроизводимости, значения которых приведены в таблице 3, %;

- среднеарифметическое значение результатов измерений массовой доли нитратов, выполненных в условиях воспроизводимости, млн

(мг/кг).

Если данное условие не выполняется, то процедуры повторяют в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-6-2003* (5.3.3).

      11 Оформление результатов

Результат определения массовой доли нитратов в исследуемых продуктах представляют в документах, предусматривающих его использование, в виде

, мг/кг, при

=0,95,

где

- среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений, млн

(мг/кг);

- границы относительной погрешности измерений, % (таблица 3).

      12 Требования, обеспечивающие безопасность

При выполнении работ необходимо соблюдать следующие требования:

- помещение лаборатории должно быть оборудовано общей приточно-вытяжной вентиляцией в соответствии с ГОСТ 12.4.021. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать норм, установленных ГОСТ 12.1.005;

- требования техники безопасности при работе с химическими реактивами - в соответствии с ГОСТ 12.1.007;

- требования техники безопасности при работе с электроустановками - в соответствии с ГОСТ Р 12.1.019.

Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004 и быть оснащено средствами пожаротушения в соответствии с ГОСТ 12.4.009.

      13 Требования к оператору

Выполнение измерений может проводить специалист, имеющий специальное образование, освоивший метод и уложившийся в норматив контроля точности при выполнении процедур контроля точности.

Приложение А

 Схема кадмиевой колонки

А.1 Схема кадмиевой колонки приведена на рисунке А.1.

1 - стеклянная колонка с краном; 2 - резервуар, соединенный с колонкой с помощью шлифа конического взаимозаменяемого КШ 14/23 по ГОСТ 8682; 3 - трубка изогнутая стеклянная; 4 - резиновая соединительная трубка

Рисунок А.1 - Колонка кадмиевая