Методические указания по методам контроля МУК 4.1.774-99 Определение содержания железа, цинка, никеля в моче методом атомной абсорбции.

     МУК 4.1.774-99

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

 Определение содержания железа, цинка, никеля

в моче методом атомной абсорбции

Дата введения 1999-09-06

УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 6 июля 1999 г.

Методические указания разработаны в соответствии с требованиями ГОСТа 8.563-96 "Методики выполнения измерений", ГОСТа Р 1.5-92 "Общие требования к построению, изложению, оформлению и содержанию стандартов". Методика анализа метрологически аттестована и обеспечивает определение в моче железа в диапазоне концентраций 0,01-0,5 мкг/см

, цинка - 0,01-0,5 мкг/см

, никеля - 0,01-0,5 мкг/см

.

Железо - серебристо-серый металл. Т

- 1539

°

С, Т

- 3200

°

С, плотность - 7,87 г/см

. Реагирует с кислотами, с углеродом образует карбиды. Относится к 3 классу опасности.

Цинк - голубовато-серебристый металл. Т

- 419,5

°

С, Т

- 906,2

°

С, плотность - 7,14 г/см

. Растворим в кислотах и щелочах. Относится к 3 классу опасности.

Никель - серебристый металл. Т

- 1453

°

С, Т

- 2140

°

С, плотность - 8,9 г/см

. Растворим в воде за сутки 0,15 мг%. Растворим в разбавленных кислотах. Относится к 1 классу опасности.

Сущность метода

Методика основана на непосредственно прямом измерении содержания металлов в биологическом материале (моче).

Определение элементов методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии основано на поглощении света соответствующей длины волны исследуемого элемента в высокотемпературном пламени.

Для измерения используется поглощение с длиной волны, соответствующей максимуму поглощения определяемого металла при прохождении через содержащий пары атомов металлов слой воздуха: железа - 248,3 нм, цинк - 213,9 нм, никель - 232,0 нм.

На одно элементоопределение в среднем затрачивается 7-10 мин, с учетом прогрева и юстировки аппаратуры, при этом выполняется 3 параллельных измерения.

Методика обеспечивает выполнение измерений с суммарной погрешностью результата измерений не более 25% при доверительной вероятности 0,95.

Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы

При выполнении применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы.

Средства измерений
Атомно-абсорбционные спектрофотометры С-115-MI, 2.851.034-04ТО, Perkin Elmer 3110
Весы аналитические ВЛР-200	ГОСТ 19491-74
Колбы мерные вместимостью 100, 200, 250, 500, 1000 см	ГОСТ 1770-74
Пипетки вместимостью 1, 5, 10 см	ГОСТ 20297-74
Пробирки с пришлифованными пробками П 4-5-14/23	ГОСТ 1770-74
Государственные образцы стандартов (ГСОРМ) ГСОРМ-24 - 1 мкг/см	ГСО 4146-97
Вспомогательные устройства
Редуктор ацетиленовый ДАП-1-65	ГОСТ 5.1381-72
Аппарат для бидистилляции воды БД-06	ТУ 25-11-43-69
Сушильный шкаф ШСС-80	ГОСТ 13474-70
Холодильник для хранения проб
Воронки диаметром 2 и 5 см
Фильтры обеззоленные белая лента
Материалы
Баллон для ацетилена	ГОСТ 949-73
Реактивы
Хлороформ	ГОСТ 20015-74
Кислота азотная концентрированная осч.	ГОСТ 4461-77

Требования к безопасности

Помещение для проведения измерений должно соответствовать требованиям "Пожарных норм проектирования зданий и сооружений" (СНиП ПА-5-700) и "Санитарных норм проектирования промышленных предприятий" (СН-245-71) и СНиП-74.

При выполнении работ должны быть соблюдены меры противопожарной безопасности в соответствии с требованиями ГОСТа 12.1.004-85 и правила техники безопасности в соответствии с ГОСТом 12.1.007-76.

При работе необходимо соблюдать "Правила по технике безопасности и производственной санитарии при работе в химических лабораториях", утверждены МЗ СССР 20.12.82 (М.,1981), и "Правила устройства и безопасной эксплуатации сосудов, работающих под давлением", утверждены Госгортехнадзором СССР 27.11.87 (М.: Недра, 1989).

При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТу 12.1.005-88.

При выполнении измерений на приборе соблюдают правила, указанные в "Руководстве по правилам эксплуатации спектрофотометра".

 Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений допускаются лица, прошедшие обучение по работе на атомно-абсорбционном спектрофотометре. К обслуживанию допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже инженера КИПиА, прошедшие инструктаж по технике безопасности на рабочем месте и ознакомленные с правилами обслуживания спектрофотометра.

 Условия измерений

При проведении процессов приготовления растворов и подготовки проб к анализу соблюдают следующие условия:

температура воздуха (20±10) °С;

атмосферное давление 630-800 мм рт.ст.;

влажность воздуха - не более 80% при температуре 25 °С.

Выполнение измерений на атомно-абсорбционных спектрофотометрах С115-М и Perkin Elmer 3110 проводят в условиях, рекомендуемых технической документацией по приборам.

 Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: подготовка атомно-абсорбционного спектрофотометра, приготовление стандартных растворов, построение калибровочной кривой.

Приготовление стандартных смесей

Для приготовления заданных концентраций стандартных растворов исследуемых металлов при измерении проб мочи используется бидистиллированная вода.

Основной стандартный раствор (5 мкг/см

) готовят из стандартного образца с концентрацией по металлу 1,05-0,95 мг/см

путем разведения 0,1 н HNO

в мерной колбе, вместимостью 100 см

. Для приготовления рабочих стандартных растворов в каждую колбу вносят основной стандартный раствор с концентрацией по металлу 5 мкг/см

в количестве в соответствии с таблицей. Срок хранения - 3 дня.

Таблица

Стандартные смеси для установления градуировочной характеристики при определении

концентрации железа, цинка и никеля (фрагмент шкалы)

Номер смеси для градуировки	1	2	3	4
Объем исходной стандартной смеси (5 мкг/см ), см	2	5	10	20
Содержание металла, мкг/см	0,10	0,25	0,50	1,00

Подготовка прибора к анализу

Атомно-абсорбционный спектрофотометр обеспечивается ацетиленом, сжатым воздухом, набором спектральных ламп, стандартных растворов определяемых металлов и после соответствующей подготовки и прогрева выводится на рабочий режим согласно инструкции. В качестве нулевого раствора используется 0,1 н HNO

.

Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику устанавливают методом абсолютной градуировки на градуировочных смесях растворов металлов. Она выражает зависимость величины абсорбции от концентрации (мкг) и строится по 4 сериям стандартных растворов. Каждую серию, состоящую из 4 стандартных растворов, готовят непосредственно перед использованием путем разведения из основного стандартного раствора.

Отбор проб

Отбор проб мочи производится в стерильную химически чистую посуду. Из суточного сбора отбирается 20 см

пробы мочи в химически чистую пробирку с пришлифованной пробкой. С целью консервирования пробы в пробирку с мочой вносится 0,05 см

хлороформа. Пробы могут храниться в холодильнике в течение 3 суток.

 Выполнение измерений

Измерение концентрации металлов в моче производится прямым определением. Результаты измерений концентраций металлов регистрируют по показаниям прибора с цифровой индикацией, откалиброванного согласно рабочим стандартным растворам определяемого металла, и представляют в протоколе в виде:

, мкг/см

,

где

-

среднее значение замеренных концентраций.

 Внутренний оперативный контроль

Внутренний оперативный контроль качества результатов контрольного химического анализа (сходимость, воспроизводимость, точность) осуществляют с целью получения оперативной информации о качестве анализов и принятия при необходимости оперативных мер по его повышению (МИ 2335-95).

Оперативный контроль воспроизводимости

Периодичность контроля воспроизводимости измерения зависит от количества рабочих измерений за контролируемый период и определяется планами контроля.

Образцами для контроля являются представительные пробы. Отбирают 2 пробы мочи и каждую из них анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают 2 результата анализа, используя разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов и разные экземпляры ГСО для градуировки прибора. В работе должны участвовать 2 аналитика.

Результаты контроля признаются удовлетворительными, если выполняется условие:

,

где

- результат анализа рабочей пробы, мкг/см

;

-

результат анализа этой же пробы, полученной другим аналитиком с использованием другого прибора, другой мерной посуды и другой партии реактивов, мкг/см

;

-

допустимые расхождения между результатами анализа одной и той же пробы, %

(

=

25%).

При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива

выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля и устраняют их.

Оперативный контроль точности

Периодичность контроля погрешности измерений зависит от количества рабочих измерений за контролируемый период и определяется планами контроля.

Образцами для контроля являются представительные пробы биосред, к которым делаются добавки в виде раствора. Отбирают 2 пробы и к одной из них делают добавку в виде раствора таким образом, чтобы их содержание увеличилось по сравнению с исходным на 50-150%. Каждую пробу анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы

и рабочей пробы с добавкой

.

Результаты анализа исходной рабочей пробы

и рабочей пробы с добавкой

получают не по возможности, а в одинаковых условиях, т.е. их получает один аналитик с использованием одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.

Результаты контроля признаются удовлетворительными, если выполняется условие:

,

где

- добавка к пробе в виде раствора с концентрацией мкг/см

;

- норматив оперативного контроля погрешности, мкг/см

.

При внешнем контроле

(

=

0,95) принимают

*,

где

и

- характеристики погрешностей для исходной пробы и пробы с добавкой, мкг/см

.

и

.

При внутрилабораторном контроле (

=0,90) принимают, что

.

При превышении оперативного контроля погрешности эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и их устраняют.