ГОСТ EN 12014-5-2014 Продукты пищевые. Определение нитрата и (или) нитрита. Часть 5. Ферментативный метод определения нитрата в продуктах для питания грудных детей и детей раннего возраста, содержащих овощи.

    ГОСТ EN 12014-5-2014

 МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ

Определение нитрата и (или) нитрита

Часть 5

Ферментативный метод определения нитрата в продуктах для питания грудных детей и детей раннего возраста, содержащих овощи

Foodstuffs. Determination of nitrate and/or nitrite content. Part 5. Enzymatic determination of nitrate content of vegetable containing food for babies and infants

МКС 67.080.20

Дата введения 2016-01-01

 Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 ПОДГОТОВЛЕН Государственным научным учреждением Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и овощесушильной промышленности Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИКОП Россельхозакадемии) на основе собственного перевода на русский язык немецкоязычной версии стандарта, указанного в пункте 5

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 30 июля 2014 г. N 68-П)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 1 августа 2014 г. N 849-ст межгосударственный стандарт ГОСТ EN 12014-5-2014 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2016 г.

5 Настоящий стандарт идентичен европейскому стандарту EN 12014-5:1997* "Продукты пищевые. Определение нитрата и (или) нитрита. Часть 5. Ферментативный метод определения нитрата в продуктах, содержащих овощи, для питания грудных детей и детей раннего возраста" ("Foodstuffs - Determination of nitrate and/or nitrite content - Part 5: Enzymatic determination of nitrate content of vegetable containing food for babies and infants", IDT).

Международный стандарт разработан техническим комитетом CEN/TC 275 "Анализ пищевых продуктов. Горизонтальные методы", секретариатом которого считается DIN.

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных и европейских стандартов соответствующие им национальные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

7 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Ноябрь 2019 г.

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.

В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"

      1 Область применения

Настоящий стандарт устанавливает ферментативный метод определения нитрата в продуктах для питания грудных детей и детей раннего возраста, содержащих овощи [1], [2]. Диапазон измерений содержания нитрата данным методом - от 50 мг/кг до 200 мг/кг.

      2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты. Для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного стандарта, для недатированных - последнее издание (включая все изменения).    

EN 12014-1 Foodstuffs. Determination of nitrate and/or nitrite content. Part 1: General considerations (Продукты пищевые. Определение нитратов и (или) нитритов. Часть 1. Общие положения)     

EN ISO 3696 Water for analytical laboratory use - Specification and test methods (ISO 3696:1987) (Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний)

      3 Сущность метода

Метод основан на экстрагировании нитратов из пробы водой и ферментативном восстановлении нитрата до нитрита в присутствии восстановленной формы кофермента никотинамидадениндинуклеотидфосфата (НАДФ·Н) по приведенной ниже реакции.

Нитрат+НАДФ·Н+Н

Нитрит+НАДФ

Нитрит+НАДФ

+

.

Количество НАДФ·Н, израсходованное в ходе данной реакции, соответствующее количеству нитрата, измеряют фотометрическим методом [3].

      4 Реактивы

Для проведения анализа при отсутствии особо оговоренных условий используют только реактивы гарантированной аналитической чистоты и дистиллированную воду или воду не ниже третьей степени чистоты по EN ISO 3696. При приготовлении растворов следует принимать во внимание массовую долю основного вещества в реактиве.     

4.1 Раствор Карреза I

Для приготовления раствора 150 г гексацианоферрата (II) калия

растворяют в некотором количестве воды, объем раствора доводят до 1000 см

водой, раствор тщательно перемешивают. Полученный раствор хранят в сосуде темного стекла. Срок годности раствора - 2 недели.     

4.2 Раствор Карреза II

Для приготовления раствора 200 г сернокислого цинка

растворяют в некотором количестве воды, объем раствора доводят до 1000 см

водой.

4.3 Натрия гидроксид, раствор молярной концентрации

c

(NaOH) = 2 моль/дм

.     

4.4 Буферный раствор на основе имидазола с рН 7,3

________________

При использовании доступных для приобретения тест-комплектов реактивы готовят в соответствии с указаниями изготовителя.

Для приготовления раствора 0,66 г имидазола

растворяют в 80 см

воды. Значение рН раствора доводят до 7,3 добавлением раствора соляной кислоты молярной концентрации

c

(HCI)=2 моль/дм

, после чего объем раствора доводят до 100 см

водой. Срок годности раствора - не менее 1 года при хранении при температуре 4°С.     

4.5 Раствор ФАД

________________

При использовании доступных для приобретения тест-комплектов реактивы готовят в соответствии с указаниями изготовителя.

Готовят раствор динатриевой соли флавинадениндинуклеотида (ФАД·

) массовой концентрации 0,17 мг/см

с использованием препарата ФАД·

массовой долей основного вещества не менее 88%. Срок годности раствора - не менее 1 дня при хранении при температуре 4°С.     

4.6 Раствор НАДФ·Н

________________

При использовании доступных для приобретения тест-комплектов реактивы готовят в соответствии с указаниями изготовителя.

Готовят раствор тетранатриевой соли бета-никотинамидадениндинуклеотидфосфата (

-НАДФ·Н·

) массовой концентрации 5,6 мг/см

с использованием препарата

-НАДФ·Н·

массовой долей основного вещества не менее 98%. Срок годности раствора не менее 1 сут при хранении при температуре 4°С и не более 2 ч при хранении при комнатной температуре.     

4.7 Раствор нитрат-редуктазы

________________

При использовании доступных для приобретения тест-комплектов реактивы готовят в соответствии с указаниями изготовителя.

Для приготовления раствора 60 мг лиофилизата нитрат-редуктазы активностью около 0,4 Е/мг

, выделенной из грибов рода

Aspergillus

(ЕС 1.6.6.2) [4], растворяют в 5 см

воды. Срок годности раствора - не менее 2 недель при хранении при температуре 4°С.

________________