ГОСТ 13496.7-97 Зерно фуражное, продукты его переработки, комбикорма. Методы определения токсичности (с Изменением N 1).

ГОСТ 13496.7-97 Зерно фуражное, продукты его переработки, комбикорма. Методы определения токсичности (с Изменением N 1).

ГОСТ 13496.7-97

Группа С19

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ЗЕРНО ФУРАЖНОЕ, ПРОДУКТЫ ЕГО ПЕРЕРАБОТКИ,

КОМБИКОРМА

Методы определения токсичности

Feed grain, grain by-products, compound feeds.

Methods for determination of toxicity

МКС 65.120

ОКСТУ 9209, 9296

Дата введения 2000-11-01

Предисловие

1 РАЗРАБОТАН Киевским институтом хлебопродуктов, Институтом ветеринарной медицины Украинской Академии аграрных наук, Всероссийским научно-исследовательским институтом комбикормовой промышленности (АООТ "ВНИИКП") и Санкт-Петербургским Государственным технологическим институтом

ВНЕСЕН Государственным комитетом Украины по стандартизации, метрологии и сертификации

2 ПРИНЯТ Межгосударственным Советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол N 12 от 21.11.97)

За принятие проголосовали:

Наименование государства	Наименование национального органа по стандартизации
Азербайджанская Республика	Азгосстандарт
Республика Армения	Армгосстандарт
Республика Беларусь	Госстандарт Беларуси
Республика Казахстан	Госстандарт Республики Казахстан
Киргизская Республика	Киргизстандарт
Российская Федерация	Госстандарт России
Республика Таджикистан	Таджикгосстандарт
Туркменистан	Главная государственная инспекция Туркменистана
Республика Узбекистан	Узгосстандарт
Украина	Госстандарт Украины

Изменение N 1 принято Межгосударственным Советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол N 13 от 28.05.98)

За принятие проголосовали:

Наименование государства	Наименование национального органа по стандартизации
Республика Армения	Армгосстандарт
Республика Беларусь	Госстандарт Беларуси
Грузия	Грузстандарт
Киргизская Республика	Киргизстандарт
Республика Молдова	Молдовастандарт
Российская Федерация	Госстандарт России
Республика Таджикистан	Таджикгосстандарт
Туркменистан	Главная государственная инспекция Туркменистана
Республика Узбекистан	Узгосстандарт
Украина	Госстандарт Украины

Постановлением Государственного комитета Российской Федерации по стандартизации и метрологии 17 октября 1999 г. N 414-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 13496.7-97 с Изменением N 1 введен в действие непосредственно в качестве государственного стандарта Российской Федерации с 1 июля 2000 г.

3 ВЗАМЕН ГОСТ 13496.7-92

4 ПЕРЕИЗДАНИЕ

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на все виды фуражного зерна, продукты его переработки и комбикорма.

Стандарт устанавливает основной (арбитражный) метод определения токсичности по кожной пробе на кроликах и взаимозаменяемые ускоренные методы - по биопробе на инфузориях тетрахимена пириформис (Tetryhymena pyriformis), инфузориях стилонихиях (Stylonychia) и инфузориях колподах (Colpoda steinii) штамм П-1.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 12.1.030-81 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Защитное заземление, зануление

ГОСТ 171-81 Дрожжи пекарские прессованные. Технические условия

ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 2603-79 Ацетон. Технические условия

ГОСТ 2715-75 Сетки металлические проволочные

ГОСТ 4328-77 Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 6038-79 Д-глюкоза. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 9147-80 Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 13496.0-80 Комбикорма, сырье. Методы отбора проб

ГОСТ 13586.3-83 Зерно. Правила приемки и методы отбора проб

ГОСТ 13805-76 Пептон сухой ферментативный для бактериологических целей. Технические условия

ГОСТ 17299-78 Спирт этиловый технический. Технические условия

ГОСТ 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия

ГОСТ 22967-90 Шприцы медицинские инъекционные многократного применения. Технические условия

ГОСТ 24104-88* Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические условия

________________

* С 1 июля 2002 г. вводится в действие ГОСТ 24104-2001.

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 27668-88 Мука и отруби. Приемка и методы отбора проб

ГОСТ 29169-91 Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой. Технические условия

ГОСТ 29227-91 Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

ГОСТ 29228-91 Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 2. Пипетки градуированные без установленного времени ожидания.

3 Методы отбора проб

Отбор проб по ГОСТ 13496.0; ГОСТ 13586.3; ГОСТ 27668.

4 Определение токсичности биопробой на кроликах (основной метод)

4.1 Сущность метода

Сущность метода заключается в проведении исследований на коже кролика, основанных на дермонекротическом действии токсичных веществ микогенного происхождения, извлекаемых из кормов ацетоном.

4.2 Аппаратура, материалы и реактивы:

- шкаф вытяжной;

- аппарат для встряхивания жидкостей;

- мельница лабораторная марки МРП-2 или других аналогичных марок;

- весы лабораторные общего назначения второго класса точности по ГОСТ 24104;

- баня водяная;

- колбы с пришлифованными пробками исполнения 2 вместимостью 500 или 1000 см

второго класса точности по ГОСТ 1770;

- чашки выпарительные N 5 вместимостью 250 см

по ГОСТ 9147;

- воронки лабораторные по ГОСТ 25336;

- цилиндры мерные исполнения 1 или 3 вместимостью 250 см

по ГОСТ 1770;

- лопатки стеклянные для нанесения экстракта;

- сито металлическое штампованное с отверстиями диаметром 1 мм;

- ножницы;

- бумага фильтровальная по ГОСТ 12026;

- кролики массой 2-3 кг;

- воротник из фанеры размером 16

20 см;

- ацетон ч. д. а. по ГОСТ 2603.

4.3 Подготовка к испытанию

4.3.1 Пробу фуражного зерна, комбикорма или комбикормового сырья (далее - корма), токсичность которой определяют, при необходимости, измельчают до прохода через сито с отверстиями диаметром 1 мм.

В колбу с пришлифованной пробкой вместимостью 500 см

помещают 50 г измельченного корма, заливают 150 см

ацетона и экстрагируют 24 ч, периодически встряхивая, или экстрагируют 3 ч на аппарате для встряхивания жидкостей. Слой экстрагента над пробой должен быть не менее 1 см.

После окончания экстракции жидкость фильтруют через бумажный фильтр в выпарительную чашку. Оставшуюся в колбе пробу корма дополнительно промывают небольшой порцией экстрагента (не менее 20 см

), промывную порцию фильтруют через тот же фильтр.

Экстракт концентрируют до получения маслянистого остатка желтоватого или коричневого оттенка. Для ускорения процесса чашку для выпаривания с экстрактом помещают на водяную баню температурой от 30 до 40 °С. Экстракт, оставшийся на стенках чашки, смывают экстрагентом на дно чашки, затем снова концентрируют. При необходимости экстракт сохраняют в холодильнике.

Примечание - Экстрагирование токсинов этим же растворителем можно проводить в аппарате Сокслета.

4.3.2 У кролика на участке кожи размером 6

6 см в области бедра, лопатки или бока в день постановки пробы тщательно выстригают волосяной покров (до полного оголения). Повреждение кожи не допускается. Пигментированная кожа, а также кожа с признаками шелушения не пригодна для проведения испытания. На одном кролике допускается ставить одновременно не более четырех проб. Повторное использование кролика для постановки пробы допускается лишь при отрицательных результатах предыдущих исследований.

4.4 Проведение испытания

На выстриженный участок кожи кролика стеклянной лопаткой наносят, слегка втирая, половину экстракта, вторую половину экстракта оставляют для повторного нанесения на следующий день. Небольшую часть оголенного участка кожи оставляют свободной от экстракта для контроля. Если экстракта недостаточно для двух нанесений, его предварительно разбавляют растительным маслом так, чтобы общее количество его было не менее 1 г.

Для предупреждения слизывания экстракта, нанесенного на кожу, на шею кролика надевают воротник, который снимают не ранее чем через 3 сут.

Наблюдение за реакцией начинают на следующий день после повторного нанесения экстракта и продолжают в течение 3-5 сут в зависимости от степени токсичности корма.

4.5 Обработка результатов

Токсичность исследуемых кормов определяют по наличию воспалительного процесса на участке нанесения экстракта:

- нетоксичный корм - отсутствие воспалительной реакции. Допускается наличие гиперемии, сохраняющейся не более 2 сут после нанесения экстракта и не сопровождающейся шелушением кожи;

- слаботоксичный корм - гиперемия, сохраняющаяся 2-3 сут после нанесения экстракта, заканчивающаяся шелушением кожи, или гиперемия, болезненность и отечность, проявляющиеся незначительным утолщением кожи с последующим образованием отдельных чешуек;

- токсичный корм - резкая гиперемия, болезненность, складчатость, отек, проявляющиеся сильным утолщением кожи, по всей поверхности участка появляются язвы, затем сплошной струп.

4.6 Оформление результатов испытания

4.6.1 Результаты испытаний заносят в журнал и (или) оформляют акт экспертизы, где указывают степень токсичности корма и возможность его применения.

4.6.2 Нетоксичный корм используют по назначению.

4.6.3 Слаботоксичный корм подлежит специальной обработке согласно правилам, утвержденным в установленном порядке, и повторному испытанию на токсичность, а также направлению на микологические и химико-токсикологические исследования.

4.6.4 Токсичный корм использованию не подлежит.

5 Определение токсичности биопробой на инфузориях тетрахимена пириформис

5.1 Сущность метода

Метод основан на экстракции ацетоном из испытуемой пробы токсичных веществ, в основном микогенного происхождения, и последующем воздействии водных растворов этих фракций на инфузории тетрахимена пириформис.

5.2 Аппаратура, материалы, реактивы

- весы лабораторные общего назначения второго класса точности по ГОСТ 24104;

- мельница лабораторная марки МПР-2, ЛЗМ или других аналогичных марок;

- микроскоп бинокулярный стереоскопический, с увеличением 7

10, марки МБС;

- рН-метр;

- аппарат для встряхивания жидкостей;

- сито металлическое штампованное с отверстиями диаметром 1 мм;

- баня водяная;

- чашки фарфоровые для выпаривания вместимостью 250 см

по ГОСТ 9147;

- колбы конические плоскодонные вместимостью 250 см

по ГОСТ 25336;

- колбы плоскодонные с пришлифованными пробками вместимостью 250 см

по ГОСТ 1770;

- пробирки стеклянные вместимостью 25 и 50 см

по ГОСТ 25336;

- пипетки исполнения 2-2-10 по ГОСТ 29169 или исполнения 2-2-2-25 по ГОСТ 29227; ГОСТ 29228;

- пипетки пастеровские;

- петля бактериологическая;

- предметные стекла;

- флакончики для антибиотиков;

- бумага фильтровальная по ГОСТ 12026;

- марля;

- пептон бактериологический по ГОСТ 13805;

- экстракт дрожжевой по нормативному документу;

- глюкоза по ГОСТ 6038;

- соль морская;

- ацетон, ч. д. а. по ГОСТ 2603;

- стандарт-титр гидроокиси натрия молярной концентрации эквивалента 0,1 моль/дм

или натрия гидроокись по ГОСТ 4328;

- липоцеребрин по фармакопее;

- спирт этиловый технический по ГОСТ 17299 или спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300;

- вода дистиллированная по ГОСТ 6709;

- инфузория тетрахимена пириформис - 3-5-суточная тест-культура.

Полная версия документа доступна с 20.00 до 24.00 по московскому времени.

Для получения доступа к полной версии без ограничений вы можете выбрать подходящий тариф или активировать демо-доступ.