ГОСТ 23041-78
Группа Н19
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
МЯСО И ПРОДУКТЫ МЯСНЫЕ
Метод определения оксипролина
Meat and meat products. Method for determination of oxyproline
МКС 67.120.10
ОКСТУ 9209
Дата введения 1979-01-01
ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ
1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Министерством мясной и молочной промышленности СССР
2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 30.03.78 N 893
3. ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
4. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ
5. Снято ограничение срока действия по протоколу N 3-93 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 5-6-93)
6. ИЗДАНИЕ (январь 2010 г.) с Изменениями N 1, 2, 3, утвержденными в августе 1983 г., июне 1985 г., декабре 1987 г. (ИУС 12-83, 10-85, 4-88)
Настоящий стандарт распространяется на мясо и мясные продукты и устанавливает метод определения оксипролина, когда определение этого показателя предусмотрено нормативно-технической документацией.
Метод основан на выделении оксипролина при кислотном гидролизе пробы продукта, проведении цветной реакции с продуктами окисления ее и измерении интенсивности развивающейся окраски.
(Измененная редакция, Изм. N 3).
1. ОТБОР И ПОДГОТОВКА ПРОБ
1.1. Пробу отбирают по ГОСТ 9792*, пропускают через мясорубку не менее двух раз до тонкого измельчения и тщательно перемешивают.
__________________
* На территории Российской Федерации дополнительно действует ГОСТ Р 51447-99.
1.2. Пробу, подготовленную для испытания, помещают в стеклянную банку вместимостью от 200 до 400 см
, заполнив ее, и закрывают крышкой.
Пробу хранят при температуре от 3 до 5 °С.
Испытания проводят в течение 24 ч.
2. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ
Мясорубка бытовая по ГОСТ 4025 или электромясорубка бытовая по ГОСТ 20469 с отверстием решетки диаметром от 3 до 4 мм.
Весы лабораторные общего назначения второго класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г с допускаемой погрешностью взвешивания ±0,001 г по ГОСТ 24104*.
Баня водяная.
Баня песчаная.
Электронагревательное устройство с песчаной баней.
Колориметр фотоэлектрический лабораторный по нормативно-технической документации с устройством для отсчитывания значения оптической плотности и интерференционным фильтром с
=(558±2) нм (рабочая длина кювет 30-50 мм, светофильтр - зеленый) или спектрофотометр для измерения в видимой области спектра.
Колба Кн-1-250-29/32 ТХС по ГОСТ 25336.
Дефлегматоры 250-29/32 ТС или холодильники ХШ-1-300-29/32 ХС по ГОСТ 25336.
Колбы мерные 1-100-2 или 2-100-2; 1-250-2 или 2-250-2; 2-1000-2 по ГОСТ 1770, вымеренные на наливной объем.
Воронки В-36-50 ХС по ГОСТ 25336.
Пробирки П4-10-14/23 по ГОСТ 25336.
Пробирки для колориметрирования должны быть из бесцветного стекла.
Пипетки 5-1-2 или 4-2-2; 7-1-5 или 7-2-5; 7-1-10 или 7-2-10.
Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026 или фильтры обеззоленные диаметром 5 и 9 см.
Фольга алюминиевая по ГОСТ 745.
Бумага индикаторная универсальная.
Хлорамин-Т.
Хлорамин-Б.
Кислота соляная по ГОСТ 3118, х.ч., плотностью 1,19 г/см и раствор
(НСl)=6 моль/дм
.
Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, х.ч. или ч.д.а., гранулированная, раствор (NaOH)=10 моль/дм
.
Спирт пропиловый (протанол), ч. и х.ч.
Спирт изопропиловый, ч. или ос.ч.
Кислота лимонная по ГОСТ 3652, х.ч.
Кислота уксусная по ГОСТ 61, х.ч.
Натрий уксуснокислый по ГОСТ 199, х.ч.
Парадиметиламинобензальдегид.
Кислота хлорная, х.ч., плотностью 1,50 г/см
, массовая доля кислоты 57% или ч.д.а., плотностью 1,32 г/см
, массовая доля кислоты 42%.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Оксипролин.
Разд.2. (Измененная редакция, Изм. N 3).
3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ
3.1. Приготовление реактивов
3.1.1. Приготовление реактива для окисления
1,41 г хлорамина-Т или хлорамина-Б разводят в 10 см
воды и последовательно добавляют 10 см
пропилового спирта и 80 см
буферного раствора. Раствор должен быть свежеприготовленный.
3.1.2. Приготовление цветного реактива
10 г парадиметиламинобензальдегида растворяют в 35 см
хлорной кислоты, непрерывно перемешивая. Полученный раствор смешивают с 65 см
пропилового спирта. Раствор приготовляют в день использования.
3.1.3. Приготовление буферного раствора (рН 6,0)
50 г лимонной кислоты, 12 см
уксусной кислоты (96 г на 100 см
), 120 г уксуснокислого натрия, 34 г гидроокиси натрия растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 см
, доводят до метки дистиллированной водой. Полученный раствор смешивают с 200 см
воды и 300 см
пропилового спирта.
3.1.4. Приготовление основного раствора оксипролина
100 мг стандартного препарата оксипролина растворяют в воде (в мерной колбе вместимостью 100 см
), добавляют каплю 6 моль/дм
(н.) соляной кислоты и доводят водой до метки. В день использования берут 1 см
основного раствора в мерную колбу вместимостью 100 см
и доводят до метки водой, тщательно перемешивая. 1 см
этого раствора содержит 0,01 мг оксипролина. Затем приготовляют четыре стандартных раствора путем разбавления 5, 10, 20 и 30 см
этого раствора водой в мерных колбах вместимостью 100 см
для получения соответственно концентраций 0,5; 1; 2 и 3 мкг/см
.
(Измененная редакция, Изм. N 1
).
3.2. Построение градуировочного графика
Измеряют оптическую плотность стандартных растворов оксипролина при длине волны 558 нм. Повторяют всю операцию определения, используя по 4 см
четырех разбавленных стандартных растворов оксипролина.
По полученным средним данным строят градуировочный график, откладывая на оси ординат величины оптической плотности, а на оси абсцисс - концентрацию оксипролина, по отмеченным точкам проводят прямую линию.
4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ
4.1. В коническую колбу вместимостью 300 см
помещают около 4 г продукта, взвешенного с погрешностью не более 0,0002 г. Добавляют 100 см
6 моль/дм
(н.) раствора соляной кислоты и кипятильные камни для равномерного кипения. Колбу соединяют с воздушным или водяным холодильником и нагревают на песчаной бане в течение 7 ч при гидролизе проб вареных и полукопченых мясных продуктов, в течение 8 ч - при гидролизе проб мяса и сырокопченых мясных продуктов.
Теплый гидролизат фильтруют в мерную колбу вместимостью 250 см
, смывая гидролизную колбу и фильтр дистиллированной водой. Объем колбы доводят водой до метки и тщательно перемешивают. Затем разбавляют гидролизат, доводя содержание оксипролина в 1 см
до 1-4 мкг. Для этого 4-10 см
гидролизата (в зависимости от предполагаемого содержания оксипролина в испытуемом продукте) вносят в мерную колбу вместимостью 100 см
и нейтрализуют 10 моль/дм
(н.) раствором гидроокиси натрия до рН 6,0 по индикаторной бумаге.
Объем доводят водой до метки и перемешивают. Переносят 4 см
этого раствора в пробирку и добавляют 2 см
реактива для окисления, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 20 мин. Затем добавляют 2 см
цветного реактива, перемешивают и пробирку закрывают алюминиевой фольгой. Одновременно готовят два контрольных раствора, используя вместо фильтрата дистиллированную воду. Пробирки быстро переносят в водяную баню с температурой (60±0,5) °С и нагревают в течение 15 мин, затем пробирки охлаждают в течение 3 мин водой или льдом и не позднее чем через 30 мин измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 558 нм. Предварительно измеряют оптическую плотность контрольных растворов одного относительно другого, а затем испытуемых в отношении контрольного.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
5. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
5.1. Массовую долю оксипролина (
) вычисляют в процентах по формуле
,
где
- количество оксипролина, найденное по градуировочному графику, мкг/см
;
- количество продукта, взятое для испытания, г;
- количество гидролизата, взятое для нейтрализации, см
;
- коэффициент пересчета в мкг;
- коэффициент пересчета в проценты.
За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое значение двух параллельных определений, расхождение между которыми не должно превышать 0,5%.
Окончательный результат вычисляют с погрешностью до 0,1%.
