ГОСТ 30417-96 Масла растительные. Методы определения массовых долей витаминов А и Е.
ГОСТ 30417-96
Группа Н69
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
МАСЛА РАСТИТЕЛЬНЫЕ
Методы определения массовых долей витаминов А и Е
Vegetable oils. Methods for determination of vitamins A and E mass fractions
МКС 67.200.10
ОКСТУ 9141, 9142
Дата введения 1998-01-01
Предисловие
1 РАЗРАБОТАН МТК 238 и Всероссийским научно-исследовательским институтом жиров (ВНИИЖ)
ВНЕСЕН Госстандартом России
2 ПРИНЯТ Межгосударственным Советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол N 10 от 4 октября 1996 г.)
За принятие проголосовали:
Наименование государства | Наименование национального органа по стандартизации |
Азербайджанская Республика | Азгосстандарт |
Республика Армения | Армгосстандарт |
Республика Белоруссия | Госстандарт Белоруссии |
Республика Казахстан | Госстандарт Республики Казахстан |
Киргизская Республика | Киргизстандарт |
Республика Молдова | Молдовастандарт |
Республика Таджикистан | Таджикский государственный центр по стандартизации, метрологии и сертификации |
Туркменистан | Туркменглавгосинспекция |
Республика Узбекистан | Узгосстандарт |
Украина | Госстандарт Украины |
Российская Федерация | Госстандарт России |
3 Постановлением Государственного комитета Российской Федерации по стандартизации, метрологии и сертификации от 12 мая 1997 г. N 158 межгосударственный стандарт ГОСТ 30417-96 введен в действие непосредственно в качестве государственного стандарта Российской Федерации с 1 января 1998 г.
4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
5 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Июль 2008 г.
1 Область применения
Настоящий стандарт распространяется на растительные масла и устанавливает методы определения массовых долей витаминов А и Е.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
ГОСТ 4147-74 Железо (III) хлорид 6-водный. Технические условия
ГОСТ 4166-76 Натрий сернокислый. Технические условия
ГОСТ 4919.1-77 Реактивы и особо чистые вещества. Методы приготовления растворов индикаторов
ГОСТ 5471-83* Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб
_______________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 52062-2003.
ГОСТ 5815-77 Ангидрид уксусный. Технические условия
ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия
ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия
ГОСТ 14919-83 Электроплиты, электроплитки и жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия
ГОСТ 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия
ГОСТ 20015-88 Хлороформ. Технические условия
ГОСТ 20490-75 Калий марганцовокислый. Технические условия
ГОСТ 24104-88* Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические условия
_______________
* С 1 июля 2002 г. действует ГОСТ 24104-2001.
ГОСТ 24363-80 Калия гидроокись. Технические условия
ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования
3 Отбор проб
Отбор проб растительных масел - по ГОСТ 5471.
4 Определение массовой доли витамина А
4.1 Аппаратура, материалы, реактивы
Весы лабораторные - по ГОСТ 24104 2-го класса точности и наибольшим пределом взвешивания 200 г.
Спектрофотометр СФ-26 или подобный с такой же разрешающей способностью или спектроколориметр, или фотоколориметр ФЭК-56 или подобный, имеющий светофильтр с эффективной длиной волны 620 нм.
Баня водяная.
Электроплитка - по ГОСТ 14919 закрытого типа.
Колба К-1-250-29/32 по ГОСТ 25336.
Колба мерная 2-100-2-10/19 по ГОСТ 1770.
Пробирки П-4-10-14/23 ХС по ГОСТ 25336.
Цилиндры 1-250 или 3-250 по ГОСТ 1770.
Воронка В-25-38 ХС или В-36-50 ХС по ГОСТ 25336.
Колба Кн-2-250-34 ТХС по ГОСТ 25336.
Воронка ДВ-1-500 по ГОСТ 25336.
Пипетка 2-1-1-1 по ГОСТ 29227.
Ретинола пальмитат [1].
Ретинола ацетат [2].
Испаритель ротационный ИР-1М или установка, состоящая из колбы К-1-100-29/32 ТС по ГОСТ 25336, холодильника ХЛТ-1-400/600/-14/23 по ГОСТ 25336, алонжа АКП-14/23 ТС по ГОСТ 25336, перехода П-10-29/32-14/23 ТС по ГОСТ 25336, колбы К-1-250-14/23 ТС по ГОСТ 25336, насоса водоструйного по ГОСТ 25336.
Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.
Спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300.
Калия гидроокись по ГОСТ 24363, ч., ч.д.а.
Кальций хлористый плавленый [3].
Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490, ч., ч.д.а.
Кислота аскорбиновая [4].
Натрий сернокислый по ГОСТ 4166, ч., ч.д.а.
Сурьма треххлористая, ч., ч.д.а., по нормативному документу.
Ангидрид уксусный по ГОСТ 5815.
Эфир этиловый очищенный [5] или эфир медицинский [6].
Фенолфталеин [7], спиртовой раствор с массовой долей индикатора 1%; готовят по ГОСТ 4919.1.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Хлороформ по ГОСТ 20015.
Допускается применение другой аппаратуры или реактивов, по качеству и метрологическим характеристикам не уступающих приведенным выше.
4.2 Условия выполнения измерений
Выполнение измерений оптической плотности продукта колориметрической реакции следует проводить быстро в течение 5-6 с.
4.3 Подготовка к проведению измерения
4.3.1 Подготовка растворов и реактивов
4.3.1.1 Приготовление безводного сернокислого натрия
Сернокислый натрий нагревают в фарфоровой чашке при температуре (100±5)°С до тех пор, пока не образуется рыхлый порошок.
4.3.1.2 Очистка диэтилового эфира
4.3.1.3 Приготовление сухого хлороформа
Хлороформ сушат над хлористым кальцием в течение суток, затем перегоняют при температуре 60-61°С и хранят в склянке из темного стекла с притертой пробкой.
4.3.1.5 Приготовление раствора треххлористой сурьмы (реагент Карр-Прайса)
4.3.2 Построение градуировочного графика
Перед построением градуировочного графика уточняют концентрацию ретинола ацетата или ретинола пальмитата спектрофотометрическим методом в соответствии с [2] или [1].
В мерной колбе взвешивают (0,10±0,01) г масляного концентрата витамина А (ретинола пальмитата или ретинола ацетата). Результат взвешивания записывают до четвертого десятичного знака. Растворяют концентрат в хлороформе, доводят хлороформом до метки и хорошо перемешивают.
(для витамина А-ацетата)
(для витамина А-пальмитата)
2907000 - активность 1 г витамина А-ацетата с массовой долей 100%, м.е.;
1807000 - активность 1 г витамина А-пальмитата с массовой долей 100%, м.е.
Примечания
1. Градуировочный график строится для каждого спектрофотометра или фотоэлектроколориметра и проверяется при смене партий реактивов и приборов путем измерения оптической плотности стандартных растворов двух разных концентраций.
2. В случае длительного хранения масляного концентрата витамина А необходимо один раз в полгода проверять его концентрацию по соответствующему градуировочному графику.
4.4 Проведение измерения
Колориметрическую реакцию и измерение проводят, как указано в 4.3.2.
4.5 Обработка результатов
Вычисления проводят до первого десятичного знака с последующим округлением результата до целого числа.
За окончательный результат измерения принимают среднеарифметическое результатов двух параллельных измерений.
Метрологические характеристики метода при доверительной вероятности 0,95 приведены в таблице 1.
Таблица 1
Значение измеряемой величины, м.е. | Предел возможных значений относительной погрешности измерений, % | Относительное расхождение между результатами двух параллельных определений (от их среднего значения), % |
От 10 до 20 включ. | 12 | 17 |
" 20 " 40 включ. | 9 | 13 |
" 40 " 70 включ. | 7 | 9 |
Если расхождение между двумя параллельными измерениями превышает указанное в таблице, измерение следует повторить.
5 Определение массовой доли витамина Е методом тонкослойной хроматографии
5.1 Аппаратура, реактивы, материалы
Весы лабораторные по ГОСТ 24104 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г или другие весы с таким же классом точности.
Шкаф сушильный лабораторный СЭШ-3М.
Баня водяная.
Колба Кн-1-250-29/32 ТС ГОСТ 25336.
Колба К-1-250-29/32 ТС ГОСТ 25336.
Воронка В-25-38 ХС или В-56-80 ХС ГОСТ 25336.
Воронка ВД-1-250 ХС ГОСТ 25336.
Пробирка П4-25-14/25 ХС ГОСТ 25336.
Холодильник воздушный.
Пипетки 2-1-1-0,5; 1-1-1-1 и 2-1-1-5 ГОСТ 29227.
Цилиндр 1-25 ГОСТ 1770.
Калия гидроокись по ГОСТ 24363, х.ч. или ч.д.а.
Спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300.
Натрий сернокислый по ГОСТ 4166.
Кальций хлористый обезвоженный чистый [3].
Эфир этиловый очищенный [5] или эфир медицинский [6].
Кислота аскорбиновая [4].
Хлороформ по ГОСТ 20015, х.ч.
Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490.
Пластинки "Силуфол".
Фенолфталеин [7], спиртовой раствор с массовой долей 1%; готовят по ГОСТ 4919.1.
Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Железо хлористое по ГОСТ 4147, спиртовой раствор с массовой долей 0,25%.
Допускается применение другой аппаратуры или реактивов, по качеству и метрологическим характеристикам не уступающих приведенным выше.
5.2 Подготовка к проведению измерения
5.2.1 Подготовка реактивов
Натрий сернокислый сушат в течение 3-4 ч при температуре (110±3)°С.
Хлороформ сушат в течение суток над хлористым кальцием и перегоняют.
Для работы используют только свежеперегнанные растворители.
Все этапы измерения следует проводить по возможности быстро, предохраняя пробы от попадания на них прямого солнечного света.
5.2.2 Подготовка камеры для хроматографирования
Не менее чем за 30 мин до начала хроматографирования в камеру наливают смесь этилового эфира и гексана (1:1) на высоту 0,5 см.
5.3. Построение градуировочного графика
Из полученного раствора готовят серию стандартных растворов в соответствии с таблицей 2.
Таблица 2
Номер раствора | Объем основного раствора, см | Объем добавляемого этилового спирта, см | Концентрация полученного раствора -токоферола ( ), мг/см |
1 | 1,0 | 19,0 | 0,05 |
2 | 0,8 | 19,2 | 0,04 |
3 | 0,6 | 19,4 | 0,03 |
4 | 0,4 | 19,6 | 0,02 |
5 | 0,2 | 19,8 | 0,01 |
6 | 0,1 | 19,9 | 0,005 |
Градуировочный график строится для каждого спектрофотометра (фотоэлектроколориметра) и проверяется при смене партий реактивов путем измерения оптической плотности стандартных растворов двух разных концентраций.
5.4 Проведение измерения
5.4.1 Выделение неомыляемых веществ
5.4.2 Выделение витамина Е с помощью тонкослойных хроматографических пластинок
В полученном таким образом растворе проводят колориметрическую реакцию и измеряют оптическую плотность, как указано в 5.3.
5.5 Обработка результатов
Вычисления проводят до второго десятичного знака с последующим округлением результата до первого десятичного знака.
За окончательный результат измерения принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных измерений.
Метрологические характеристики метода при доверительной вероятности 0,95 приведены в таблице 3.
Таблица 3
Измеряемая величина, мг % | Предел возможных значений абсолютной погрешности измерений, мг % | Абсолютное допустимое расхождение между результатами двух параллельных определений (от их среднего значения), мг % |
От 10,0 до 30,0 включ. | 2,4 | 4,8 |
" 30,0 " 100,0 " | 6,8 | 13,5 |
" 100,0 " 200,0 " | 10,0 | 19,5 |
ПРИЛОЖЕНИЕ А
(справочное)
Библиография
[1]
| ФС 42-2229-84 Ретинола пальмитат
|
[2]
| Госфармакопея, X изд., ст.578 Ретинола ацетат
|
[3] | ТУ 6-09-4711-81* Кальций хлористый обезвоженный чистый |
| |
[4]
| ФС 42-2668-89 Кислота аскорбиновая
|
[5] | ОСТ 84-2006-82* Эфир этиловый очищенный |
| |
[6]
| Госфармакопея, X изд., ст.34 Эфир медицинский
|
[7]
| ТУ 6-09-5360-87 Фенолфталеин
|
[8]
| ФС 42-2495-87 -токоферола ацетат |
[9] | ТУ 64-5-68-88 -токоферола ацетат (витамин Е) |
УДК 665.335.5.001.4:006.354 | МКС 67.200.10 | Н69 | ОКСТУ 9141, 9142 |
|
|
|
|
Ключевые слова: растительные масла, область применения, ссылки, определение массовых долей витаминов А и Е, метод тонкослойной хроматографии |