ГОСТ Р 51443-99 Соки фруктовые и овощные. Метод определения содержания общих каротиноидов и их фракционного состава.
ГОСТ Р 51443-99
Группа Н59
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
СОКИ ФРУКТОВЫЕ И ОВОЩНЫЕ
Метод определения содержания общих каротиноидов и их фракционного состава
Fruit and vegetable juices. Method for determination of total carotinoid content and content of individual carotinoid fractions
ОКС 67.160.20
ОКСТУ 9109
Дата введения 2001-01-01
Предисловие
1 РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и овощесушильной промышленности (ВНИИКОП)
ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 93 "Продукты переработки плодов и овощей"
2 ПРИНЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 22 декабря 1999 г. N 598-ст
3 Стандарт гармонизирован с европейским стандартом ЕН 12136:1997* "Соки фруктовые и овощные. Определение содержания общих каротиноидов и их фракционного состава"
4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
5 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Июль 2010 г.
1 Область применения
Настоящий стандарт распространяется на фруктовые и овощные соки и подобные им продукты и устанавливает метод определения массовой концентрации или массовой доли общих каротиноидов и их фракционного состава.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Технические условия
ГОСТ 2603-79 Реактивы. Ацетон. Технические условия
ГОСТ 4166-76 Реактивы. Натрий сернокислый. Технические условия
ГОСТ 4174-77 Реактивы. Цинк сернокислый 7-водный. Технические условия
ГОСТ 4207-75 Реактивы. Калий железистосинеродистый 3-водный. Технические условия
ГОСТ 5789-78 Реактивы. Толуол. Технические условия
ГОСТ 24104-88* Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические условия
________________
* С 1 июля 2002 г. действует ГОСТ 24104-2001. На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008.
ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 26313-84 Продукты переработки плодов и овощей. Правила приемки, методы отбора проб
ГОСТ 26671-85 Продукты переработки плодов и овощей, консервы мясные и мясорастительные. Подготовка проб для лабораторных анализов
ГОСТ 29169-91 (ИСО 648-77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой
ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования
ГОСТ Р 51431-99 Соки фруктовые и овощные. Метод определения относительной плотности
ГОСТ Р 52501-2005 (ИСО 3696:1987) Вода для лабораторного анализа. Технические условия
3 Определения и обозначения
3.1 Определения
В настоящем стандарте применяют следующие термины с соответствующими определениями:
3.1.1 фракция I каротиноидов (в основном углеводороды): Вещества, элюируемые петролейным эфиром, как описано в 8.3.
3.1.2 фракция II каротиноидов (эфиры криптоксантина): Вещества, элюируемые смесью А, как описано в 8.3.
3.1.3 фракция III каротиноидов (эфиры ксантофилла): Вещества, элюируемые смесью Б, как описано в 8.3.
3.1.4 фракция IV каротиноидов: Вещества, элюируемые ацетоном, как описано в 8.3.
3.2 Обозначения
В настоящем стандарте используют следующее обозначение:
4 Сущность метода
5 Средства измерений, лабораторное оборудование, реактивы и материалы
Спектрофотометр с диапазоном измерения, позволяющим проводить исследования при длине волны 450 нм, с допустимой абсолютной погрешностью измерений коэффициента пропускания не более 1%; кюветы стеклянные или кварцевые, не имеющие существенного поглощения при длине волны 450 нм, рабочей длиной 10 мм.
Хроматографическая колонка длиной от 250 до 300 мм внутренним диаметром 20 мм, снабженная запорным краном из полиэтилентетрафталата (ПЭТФ).
Ротационный вакуумный испаритель.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ: поскольку анализ предусматривает использование летучих пожароопасных растворителей, применяемая электрическая аппаратура должна отвечать установленным нормам, связанным с опасностью использования таких растворителей.
Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 200 г 2-го класса точности.
Вода для лабораторного анализа ГОСТ Р 52501 не ниже 3-й категории.
Допускается использование других средств измерений, лабораторного оборудования, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками не ниже указанных.
6 Отбор и подготовка проб
6.1 Отбор проб - по ГОСТ 26313.
6.2 Подготовка проб - по ГОСТ 26671.
Концентрированные продукты разводят водой до заданного значения относительной плотности в соответствии с нормативным или техническим документом на конкретный вид продукта. Определяют относительную плотность разбавленного продукта по ГОСТ Р 51431 и ее значение указывают в протоколе.
7 Подготовка к проведению испытаний
7.1 Приготовление смесей элюентов
Смесь А готовят смешиванием четырех объемов петролейного эфира с одним объемом толуола.
Смесь Б готовят смешиванием двух объемом петролейного эфира с одним объемом толуола.
7.2 Приготовление частично деактивированного оксида алюминия
Деактивированный оксид алюминия имеет степень активности IV-V уровня. Поскольку степень активности изменяется при длительном хранении, требуемые количества должны быть использованы в течение 2-24 ч с момента приготовления.
8 Проведение испытаний
8.1 Условия проведения испытаний
Каротиноиды чувствительны к свету и теплу, поэтому анализы должны проводиться в месте, защищенном от прямого солнечного света и ультрафиолетового излучения.
8.2 Определение содержания общих каротиноидов
Проводят два параллельных определения.
Почти бесцветный надосадочный раствор декантируют и отбрасывают.
Примечание - Если приходится проводить экстракцию больше чем в два этапа, следует остерегаться образования эмульсии. Если имеется опасность неполной экстракции, рекомендуется начать процедуру с самого начала, используя меньший объем или массу исследуемой порции продукта.
Измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 450 нм в кювете с оптическим промежутком 10 мм; в качестве раствора сравнения используют петролейный эфир.
8.3 Определение содержания отдельных фракций каротиноидов
Примечание - При внесении исследуемого раствора в колонку следует избегать какого-либо возмущения слоя оксида алюминия; уровень исследуемого раствора должен достигать поверхности адсорбента без всплеска, благодаря внесению растворителя небольшими порциями.
Элюируют отдельные фракции каротиноидов при скорости примерно 2 капли в секунду, используя:
петролейный эфир для фракции I;
элюирующую смесь А для фракции II;
элюирующую смесь Б для фракции III.
С целью уменьшения общего объема элюата первые бесцветные порции стекающего раствора отбрасывают. Чтобы гарантировать полное извлечение каждой из фракций, проводят элюирование до тех пор, пока элюат не становится бесцветным.
Измеряют оптическую плотность растворов для каждой из фракций против холостого раствора - петролейного эфира, при длине волны 450 нм, используя кюветы с 10 мм оптическим промежутком.
Примечание - Использование толуола в различных пропорциях не оказывает влияния на коэффициент поглощения.
Остаток каротиноидов в хроматографической колонке может быть элюирован ацетоном как фракция IV.
Сумма фракций каротиноидов, элюированных из колонки, как правило, должна составлять не менее 90% от содержания общих каротиноидов. Если это число оказывается значительно меньше, то из этого следует, например, что в образец мог быть добавлен биксин. Это осадок красно-желтого цвета в хроматографической колонке после элюирования фракции IV.
Примечание - Биксин может быть элюирован смесью, состоящей из четырех частей ацетона и одной части аммиака (по объему). Его присутствие может быть подтверждено другими хроматографическими методами.
9 Обработка и оформление результатов
Аналогично определяют содержания отдельных фракций каротиноидов и выражают их в процентах от содержания общих каротиноидов.
для содержания общих каротиноидов - 10,
для фракции I - 20,
для фракции II - 12,
для фракции III - 17.
При соблюдении этого условия за окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений, указываемое с точностью до двух значащих цифр.
для содержания общих каротиноидов - 23,
для фракции I - 50,
для фракции II - 30,
для фракции III - 35.
для содержания общих каротиноидов ±16,
для фракции I ±35,
для фракции II ±21,
для фракции III ±25.
В протоколе испытаний указывают:
- информацию, необходимую для идентификации исследуемого продукта (вид продукта, происхождение, шифр);
- ссылку на настоящий стандарт;
- дату и способ отбора проб (по возможности);
- дату получения пробы для испытаний;
- дату проведения испытаний;
- результат испытаний с указанием погрешности и единицы измерения;
- соблюдение норматива контроля сходимости результатов;
- особенности проведения испытаний (разведение концентрированной пробы, относительную плотность разведенной пробы и пр.);
- отклонения условий проведения испытаний от описанных в стандарте, которые могли повлиять на результат.
ПРИЛОЖЕНИЕ А
(справочное)
Библиография
[1] ТУ 6-09-3916-75* Алюминия оксид 1-й степени активности для хроматографии
_______________________________________________________________________________________
УДК 664.863.001.4:006.354 ОКС 67.160.20 Н59 ОКСТУ 9109
Ключевые слова: фруктовые и овощные соки, определение содержания, общие каротиноиды, фракции общих каротиноидов, метод анализа
_______________________________________________________________________________________
