ГОСТ 30349-96 Плоды, овощи и продукты их переработки. Методы определения остаточных количеств хлорорганических пестицидов.

     ГОСТ 30349-96

Группа Н59

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

 ПЛОДЫ, ОВОЩИ И ПРОДУКТЫ ИХ ПЕРЕРАБОТКИ

 Методы определения остаточных количеств хлорорганических пестицидов

 Fruits, vegetables and derived products.

Methods for determination of organochlorine pesticide residues

МКС 67.080.01

ОКСТУ 9109

Дата введения 1998-01-01

Предисловие

1 РАЗРАБОТАН Межгосударственным техническим комитетом МТК 335 и Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и овощесушильной промышленности (ВНИИКОП), Научно-исследовательским институтом химических средств защиты растений (НИИХСЗР)

ВНЕСЕН Госстандартом России

2 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол N 10 от 4 октября 1996 г.)

За принятие проголосовали:

3 Постановлением Государственного комитета Российской Федерации по стандартизации, метрологии и сертификации от 26 марта 1997 г. N 111 межгосударственный стандарт ГОСТ 30349-96 введен в действие непосредственно в качестве государственного стандарта Российской Федерации с 1 января 1998 г.

4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

5 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Январь 2008 г.

      1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на плоды, овощи и продукты их переработки и устанавливает методы контроля в них остаточных количеств хлорорганических пестицидов: ДДТ - 4,4’-дихлордифенилтрихлорэтана и его метаболитов: ДДД - 4,4’-дихлордифенилдихлорэтана и ДДЭ - 4,4’-дихлордифенилдихлорэтилена; ГХЦГ и его изомеров: линдана - гамма-изомера гексахлорциклогексана, альфа-изомера гексахлорциклогексана, бета-изомера гексахлорциклогексана, гептахлора, кельтана и альдрина с помощью тонкослойной и газожидкостной хроматографии.

Стандарт предназначен для научно-исследовательских учреждений, испытательных центров и лабораторий, производственных лабораторий агрохимической и санитарно-эпидемиологической служб.

      2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 949-73 Баллоны стальные малого и среднего объема для газов на

19,6 МПа (200 кгс/см

). Технические условия

ГОСТ 1277-75 Серебро азотнокислое. Технические условия

ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 2603-79 Ацетон. Технические условия

ГОСТ 3760-79 Аммиак водный. Технические условия

ГОСТ 3956-76 Силикагель технический. Технические условия

ГОСТ 4166-76 Натрий сернокислый. Технические условия

ГОСТ 4201-79 Натрий углекислый кислый. Технические условия

ГОСТ 4204-77 Кислота серная. Технические условия

ГОСТ 5556-81 Вата медицинская гигроскопическая. Технические условия

ГОСТ 5955-75 Бензол. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 9293-74 (ИСО 2435-73) Азот газообразный и жидкий. Технические условия

ГОСТ 10929-76 Водорода пероксид. Технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия

ГОСТ 21400-75 Стекло химико-лабораторное. Технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 22300-76 Эфиры этиловый и бутиловый уксусной кислоты. Технические условия

ГОСТ 24104-88* Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические условия

________________

* С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104-2001.

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

      3 Отбор и подготовка проб

3.1 Отбор проб и подготовка их к анализу - в соответствии с нормативной документацией на конкретную продукцию и с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР N 2051-79, 21.08.79.

      4 Метод тонкослойной хроматографии

4.1 Сущность метода

Метод основан на экстракции пестицидов органическим растворителем из продукта, очистке экстракта, упаривании его досуха и хроматографировании в тонком слое. Метод предназначен для анализа содержания остаточных количеств пестицидов ДДТ и его метаболитов, гамма-ГХЦГ, кельтана, альдрина, гептахлора.

4.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания до 200 г не ниже 3-го класса точности.

Весы полумикроаналитические с метрологическими характеристиками по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания до 20 г не ниже 2-го класса точности.

Испаритель ротационный ИР-1М по нормативному документу (НД) [1] (приложение А).

Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с по НД [2].

Лампа ртутно-кварцевая типа ПРК-4.

Колбы перегонные К-1-250-29/32 по ГОСТ 25336.

Колбы Гр-25-14/23 по ГОСТ 25336.

Колбы мерные 2-50-2; 2-100-2; 2-500-2 по ГОСТ 1770.

Воронка В-56-80 ХС по ГОСТ 25336.

Колба коническая Кн-1-250-29/32 по ГОСТ 25336.

Цилиндры мерные 1-50, 1-100 по ГОСТ 1770.

Пробирки с притертыми пробками вместимостью 10 см

по ГОСТ 25336.

Стеклянные банки с притертыми крышками, вместимостью 500, 1000 см

.

Воронки делительные ВД-100-29/32, ВД-250-29/32 по ГОСТ 25336.

Стакан В-1-50 по ГОСТ 25336.

Пипетки 1-2-2-5, 1-2-2-10 по ГОСТ 29227.

Палочка из химико-лабораторного стекла по ГОСТ 21400.

Вата медицинская гигроскопическая по ГОСТ 5556.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026 или фильтры бумажные по НД [3].

Пластинки хроматографические "Силуфол" производства Чехии или "Сорбфил" по НД [4].

Камера для хроматографирования: сосуд с плоским дном, закрывающийся пришлифованной крышкой, или эксикатор по ГОСТ 25336.

Пульверизатор стеклянный.

Колонка стеклянная хроматографическая для очистки экстрактов из продуктов, содержащих жир: узкая часть - длина (50±2) см, диаметр (1,7±0,3) см, широкая часть - длина (1,5±2) см, диаметр (2,5±0,2) см.

Кислота серная по ГОСТ 4204, х.ч., плотностью 1,84 г/см

.

Гексан, ч., очищенный концентрированной серной кислотой, отмытый дистиллированной водой, высушенный кристаллическим едким кали и перегнанный с дефлегматором по НД [5].

Ацетон по ГОСТ 2603, х.ч., перегнанный.

Аммиак водный по ГОСТ 3760, ч.д.а.

Спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300.

Хлороформ, х.ч., перегнанный по НД [6].

Этилацетат по ГОСТ 22300, перегнанный.

Ацетонитрил, х.ч. по НД [7].

Бензол по ГОСТ 5955, х.ч.

2-Феноксиэтанол по НД [8].

Водорода пероксид по ГОСТ 10929, 30%-ный раствор.

Натрий сульфат безводный по ГОСТ 4166, ч.

Натрий углекислый кислый по ГОСТ 4201, ч.д.a.

Серебро азотнокислое по ГОСТ 1277, х.ч.

Силикагель марки АСК, измельченный и просеянный через сито 0,30 мм по ГОСТ 3956.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Уголь активированный любой марки.

Бумага индикаторная универсальная для определения рН по НД [9].

Эталоны хлорорганических пестицидов: кельтана, ДДТ, ДДД, ДДЭ, ГХЦГ, альдрина, гептахлора гарантированной степени чистоты с содержанием основного вещества не менее 95%.

Допускается применение других средств измерений, аппаратуры и реактивов, характеристики которых не уступают характеристикам указанных выше средств измерений, аппаратуры и реактивов.

4.3 Подготовка к анализу

4.3.1 Очистка силикагеля АСК

В стакан насыпают силикагель, заливают гексаном, перемешивают, гексан сливают. Промывку повторяют три раза. Промытый силикагель прокаливают при температуре 180 °С в течение 2 ч. Хранят в плотно закрытой стеклянной банке.

4.3.2 Очистка ваты

В коническую колбу помещают вату, заливают гексаном, выдерживают 15 мин. Операцию повторяют два раза. Очищенную вату сушат на воздухе под тягой. Хранят в закрытой стеклянной банке.

4.3.3 Подготовка хроматографической колонки для очистки от жиров

В нижнюю часть колонки помещают кусочек очищенной ваты, насыпают силикагель АСК на высоту (26,0±0,5) см, уплотняют постукиванием по колонке деревянной палочкой. Затем помещают силикагель, пропитанный серной кислотой в отношении 4:1 (по массе), на 3 см, далее насыпают безводный сульфат натрия слоем (1,0±0,5) см. Через колонку пропускают 30 см

гексана и отжимают резиновой грушей. Эффективность колонки проверяют, внося 5 см

смеси хлорорганических пестицидов с заданной концентрацией (в пределах 0,1-0,2 мкг). Дают возможность раствору впитаться в колонку, а затем элюируют пестициды 50 см

гексана со скоростью одна капля в секунду.

Элюат с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют при температуре 40 °С. К сухому остатку пипеткой добавляют 10 см

гексана, колбу закрывают пробкой на шлифе. Стенки колбы ополаскивают растворителем и аликвотную часть раствора (5 мкдм

) вводят в хроматограф и проводят измерения. При определении не менее 90% от заданного количества пестицидов сорбент можно считать пригодным для работы, а колонку использовать для анализа. При поступлении новой партии силикагеля проверяют его эффективность, как описано выше в 4.3.3.

4.3.4 Приготовление растворов для проявления пятен на пластинках

Раствор 1. 0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 5 см

дистиллированной воды, прибавляют 10 см

аммиака и доводят объем до 100 см

ацетоном. Раствор хранят в течение 3 дней в холодильнике.

Раствор 2. 0,25 г азотнокислого серебра помещают в мерную колбу вместимостью 100 см

, приливают 2,5 см

дистиллированной воды, 5 см

2-феноксиэтанола, доводят до метки ацетоном и добавляют 3 капли 30%-ного раствора пероксида водорода.

4.3.5 Подготовка хроматографической камеры

В хроматографическую камеру за 1 ч до начала хроматографирования заливают смесь подвижных растворителей для насыщения ее парами. Объем подвижного растворителя в камере должен находиться на высоте не более чем 0,5 см от уровня дна.

4.3.6 Приготовление основных растворов пестицидов с массовой концентрацией 100 мкг/см

Для приготовления основного раствора любого пестицида 10 мг эталонного препарата растворяют гексаном в мерной колбе вместимостью 100 см

и доводят гексаном до метки. Хранят основные растворы в колбах с притертой пробкой в холодильнике в течение 6 мес.

4.3.7 Подготовка пластин "Силуфол" для хроматографирования

Пластины "Силуфол" перед употреблением промывают. Для этого в хроматографическую камеру наливают систему растворителей ацетон-аммиак (1:1) на высоту 5-7 мм и помещают туда пластинки в вертикальном положении. После того, как линия фронта подвижного растворителя поднимется, не доходя 10 мм до верха пластинки, ее вынимают, высушивают на воздухе, затем активируют в сушильном шкафу при температуре 110 °С в течение 30-60 мин. Перед употреблением с вертикальных сторон пластинки удаляют слой в 3 мм, что способствует выравниванию фронта растворителя.

4.4 Проведение анализа

4.4.1 Из объединенной пробы продукта отбирают навеску массой 50,0 г, помещают в коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 250 см

и заливают 100 см

этилацетата. Содержимое колбы перемешивают в течение 20 мин на аппарате для встряхивания.

Экстракт декантируют в круглодонную колбу, пропуская через слой безводного сернокислого натрия. Эту операцию повторяют еще 2 раза. Экстракт объединяют и концентрируют с помощью ротационного испарителя досуха при температуре водяной бани 40-45 °С.

4.4.2 Очистка экстракта

Сухой остаток количественно переносят с помощью 5 см

гексана в делительную воронку вместимостью 100 см

, добавляют 5 см

концентрированной серной кислоты и содержимое воронки осторожно встряхивают 5-10 раз. После разделения слоев нижний слой сливают и отбрасывают. Очистку экстракта повторяют еще несколько раз. Очищенный экстракт промывают дважды раствором бикарбоната натрия с массовой долей 1% порциями по 5 см

, а затем дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод. Гексановый раствор количественно переносят в колбу грушевидной формы вместимостью 25 см

и отгоняют на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40-45 °С.

4.4.3 Если анализируют объекты, содержащие жир, то полученный по 4.4.2 экстракт подвергают дополнительной очистке на колонке. Сухой остаток растворяют в 10 см

гексана, переносят на колонку, подготовленную по 4.3.3, и элюируют пестициды с помощью 110 см

смеси бензола с гексаном в соотношении 4:7 со скоростью одна капля в секунду. Элюат обезвоживают, пропуская через слой безводного сернокислого натрия и отгоняют растворитель досуха.

4.4.4 Для очистки экстракта от восков сухой остаток, полученный по 4.4.1, растворяют охлажденной смесью ацетона и воды в соотношении 2:1 и выдерживают 30 мин в холодильнике. Воски отфильтровывают через бумажный фильтр, который промывают охлажденной смесью ацетона и воды 2:1. Пестициды экстрагируют из водно-ацетонового раствора гексаном. Растворитель упаривают.

4.4.5 Сухой очищенный остаток растворяют в колбе, внося пипеткой 1 см

гексана. 0,1 см

полученного раствора наносят микропипеткой или шприцем на хроматографическую пластинку на линию старта, находящуюся от края на расстоянии 1,0 см. Для увеличения чувствительности метода сухой остаток растворяют в нескольких каплях гексана и полностью наносят на пластинку. Справа и слева от пробы наносят стандартные растворы пестицидов, содержащие 1, 2, 4, 5, 10 мкг препарата.

После нанесения пробы на пластинку "Силуфол" ее помещают в хроматографическую камеру с подвижным растворителем (N 1) - гексан-ацетон (6:1) или (N 2) - гексан (таблица 1). После того, как фронт растворителя поднимется по пластинке, ее вынимают из камеры, обрабатывают проявляющим реактивом и подвергают УФ-облучению в течение 5-10 мин лампой типа ПРК-4. Пластины располагают на расстоянии 20 см от источника света.

При отсутствии пластин "Силуфол" можно использовать пластины "Сорбфил" отечественного производства, с системой подвижных растворителей ацетонитрил-вода (2:1) (таблица 1).

При наличии хлорорганических пестицидов при описанных выше условиях на пластинах проявляются пятна серо-черного цвета на светлом фоне. По значениям соответствующих

определяют, какие пестициды присутствуют в продукте (таблица 1).

Таблица 1 - Ориентировочные значения

пестицидов в различных системах растворителей

Наименование пестицидов	Система растворителей
	N 1 гексан-ацетон (6:1)	N 2 гексан	ацетонитрил-вода (2:1)
	значение на пластинках "Силуфол"		значение на пластинках "Сорбфил"
Кельтан	0,15	0,05	0,21
Гамма-ГХЦГ	0,23	0,15	0,30
4,4’-ДДД	0,32	0,37	0,42
Гептахлор	0,57	0,45	0,73
4,4’-ДДЭ	0,61	0,45	0,70
Альдрин	0,70	0,82	0,80
4,4’-ДДТ	0,78	0,67	0,85

4.5 Обработка результатов

4.5.1 Измерение содержания пестицидов проводят путем сопоставления площади пятна испытуемого экстракта и площади пятна рабочего стандартного раствора, наиболее близкого по интенсивности окраски к пятну экстракта. Площади пятен измеряют с помощью линейки или шаблона из миллиметровой бумаги. Содержание пестицидов

,

мг/кг, вычисляют по формуле

,                                                          (1)

где

-

масса пестицида в 1 см

стандартного раствора, мкг;

-

масса навески исследуемого продукта, г;

- площадь пятна, полученного при нанесении испытуемого экстракта, мм

;

- площадь пятна, полученного при нанесении стандартного раствора, мм

;

-

объем экстракта, в котором перерастворен сухой остаток, см

;

-

объем исследуемого экстракта, нанесенного на пластинку, см

.

При нанесении всей пробы

.

4.5.2 Вычисления проводят до первого десятичного знака. Окончательный результат округляют до целого числа.

4.5.3 За окончательный результат испытаний принимают среднеарифметическое значение результатов (

) двух параллельных определений, расхождение между которыми не должно превышать 30% по отношению к среднеарифметическому значению при

0,95.

4.5.4 Пределы возможных значений систематической составляющей погрешности измерений содержания пестицидов любой пробы при допускаемых методом изменениях влияющих факторов ±0,15

.

4.5.5 Минимально обнаруживаемое содержание пестицидов в хроматографируемой пробе 1 мкг.

4.5.6 Значение среднеквадратичного отклонения случайной составляющей погрешности измерений содержания пестицидов одной и той же пробы при допускаемых методом изменениях влияющих факторов составляет 0,2

.

4.5.7 При измерении содержания пестицидов в овощах и фруктах, соках, компотах, пюре полнота обнаружения варьирует в пределах: для гамма-ГХЦГ - 75-80%, кельтана - 75-85%, альдрина - 72-80%, 4,4’-ДДТ - 76-90%, 4,4’-ДДД - 75-85%, 4,4’-ДДЭ - 70%.

      5 Метод газожидкостной хроматографии

5.1 Сущность метода

Метод основан на экстракции пестицидов этилацетатом, очистке экстракта концентрированной серной кислотой или силикагелем АСК с последующим анализом хлорорганических пестицидов на газовом хроматографе с детектором захвата электронов.

Метод предназначен для анализа остаточных количеств пестицидов альфа-, бета-, гамма-ГХЦГ, кельтана, альдрина, гептахлора, ДДТ и его метаболитов.

Газохроматографический метод используют при возникновении разногласий в оценке результатов.

5.2 Аппаратура, материалы и реактивы

При проведении испытания применяют аппаратуру, материалы и реактивы по 2.2 со следующим дополнением:

Газовый хроматограф Газохром 1109 или аналогичный с детектором захвата электронов.

Микрошприц МШ 10.

Колонки хроматографические стеклянные для газового хроматографа длиной 1,0 м, диаметром 3 мм и длиной 1,5 м, диаметром 3 мм.

Баллон стальной по ГОСТ 949.

Азот газообразный по ГОСТ 9293, марки "особой чистоты" или азота с содержанием кислорода не более 0,004%.

Насадки для колонки: 5% OV-17 на хроматоне N-AW-DMCS (0,16-0,20 мм), 3% OV-210 на хроматоне N-супер (0,125-0,16 мм) или 5% SE-30 на хроматоне N-AW-DMCS (0,16-0,20 мм).

5.3 Подготовка к анализу

5.3.1 Очистка силикагеля АСК - по ГОСТ 4.3.1.

5.3.2 Очистка ваты - по 4.3.2.

5.3.3 Подготовка хроматографической колонки для очистки от жиров - по 4.3.3.

5.3.4 Приготовление градуировочных растворов пестицидов

Основные градуировочные растворы с массовой концентрацией (100±0,5) мкг/см

готовят весовым способом отдельно для каждого пестицида путем растворения навески 10 мг в мерной колбе вместимостью 100 см

в гексане. Из основных растворов готовят промежуточные градуировочные растворы массовых концентраций: 1 мкг/см

(раствор 1), 0,1 мкг/см

(раствор 2) и 0,01 мкг/см

(раствор 3), перенося пипеткой в мерные колбы вместимостью 100 см

соответственно 1 и 0,1 см

основного раствора пестицида. Для приготовления промежуточного раствора 3 с содержанием 0,01 мкг/см

в мерную колбу вместимостью 100 см

переносят 1 см

промежуточного раствора 1 и доводят до метки гексаном.

Все промежуточные растворы стабильны при хранении в колбах с притертой пробкой в холодильнике в течение 6

мес.

5.3.5 Подготовка газового хроматографа

5.3.5.1 Подготовка хроматографической колонки

Сухую стеклянную колонку, предварительно промытую хромовой смесью, этиловым спиртом, затем диэтиловым эфиром, заполняют носителем с помощью вакуумного или водоструйного насоса. При этом набивку колонки периодически уплотняют, постукивая по колонке деревянной палочкой. Установленную в термостате хроматографическую колонку перед работой кондиционируют в следующем режиме: 2 ч при 100 °С; 2 ч при 150 °С; 4 ч при 200 °С; 4 ч при 220 °С. При кондиционировании колонка должна быть отключена от детектора. Кондиционирование следует проводить при смене колонки, а также после длительных перерывов в работе.

5.3.5.2 Приготовление шкалы градуировочных растворов

В пробирках вместимостью 5 см

с пробками на шлифах для каждого пестицида готовят шкалу градуировочных растворов (см. таблицы 2, 3, 4). Для этого пипетками вносят определенный объем промежуточных растворов пестицидов и недостающий до 5 см

объем гексана.

Таблица 2 - Шкала градуировочных растворов для альфа-ГХЦГ и 4,4’-ДДЭ

Характеристика раствора	Номер градуировочного раствора
	1	2	3	4	5	6	7	8
Объем промежуточного раствора 3 (0,01 мкг/см ), см	1	2	5	-	-	-	-	-
Объем промежуточного раствора 2 (0,1 мкг/см ), см	-	-	-	1	2	3	4*	5*
Объем гексана, см	4	3	0	4	3	2	1	0
Массовая концентрация пестицида в полученном градуировочном растворе, мкг/см	0,002	0,004	0,01	0,02	0,004	0,06	0,08*	0,1
Масса пестицида в 5 мкл хроматографируемой пробы, нг (10 мкг)	0,01	0,02	0,05	0,1	0,2	0,3	0,4*	0
* Только для 4,4’-ДДЭ.

Таблица 3 - Шкала градуировочных растворов для гамма- и бета-ГХЦГ, альдрина и гептахлора

Характеристика раствора	Номер градуировочного раствора
	1	2	3	4	5	6	7
Объем промежуточного раствора 3 (0,01 мкг/см ), см	3	5	-	-	-	-	-
Объем промежуточного раствора 2 (0,1 мкг/см ), см	-	-	1	2	3	4	5
Объем гексана, см	2	0	4	3	2	1	0
Массовая концентрация пестицида в полученном градуировочном растворе, мкг/см	0,006	0,01	0,02	0,02	0,06	0,08	0,1
Масса пестицида в 5 мкл хроматографируемой пробы, нг (10 мкг)	0,03	0,05	0,1	0,2	0,3	0,4	0,5

Таблица 4 - Шкала градуировочных растворов для 4,4’-ДДТ, 4,4’-ДДД и кельтана

Характеристика раствора	Номер градуировочного раствора
	1	2	3	4	5	6	7	8
Объем промежуточного раствора 2 (0,1 мкг/см ), см	0,5*	1	2	3	4	5	-	-
Объем промежуточного раствора 1 (1 мкг/см ), см	-	-	-	-	-	-	1	2**
Объем раствора гексана, см	4,5	4	3	2	1	0	4	3
Массовая концентрация пестицида в полученном растворе, мкг/см	0,01*	0,02	0,04	0,06	0,08	0,1	0,2	0,4**
Масса пестицида в 5 мкл хроматографируемой пробы, нг (10 мкг)	0,05*	0,1	0,2	0,3	0,4	0,5	1	2**
* Только для 4,4’-ДДД.           ** Только для 4,4’-ДДТ.

Градуировочные растворы хранят не более двух недель. При проверке градуировочных графиков готовят свежие градуировочные растворы.

5.4 Проведение анализа

5.4.1 Взятие навески пробы продукта и подготовку экстракта пестицидов проводят по 4.4.1-4.4.3.

5.4.2 Сухой остаток, полученный по 5.4.1, растворяют в 10 см

гексана.

5.4.3 Условия хроматографирования

5 мкдм

гексанового раствора вводят в испаритель газового хроматографа и анализируют в условиях, указанных в таблице 5.

Таблица 5 - Условия газохроматографического разделения хлорорганических пестицидов на различных колонках

Параметр	Колонка 1		Колонка 2		Колонка 3
Насадка колонки	5% OV-17 на хроматоне N-AW-DMCS (0,16-0,20 мм)		3% OV-210 на хроматоне N-супер (0,125-0,16 мм)		5% SE-30 на хроматоне N-AW-DMCS (0,16-0,20 мм)
Длина колонки (см) и внутренний диаметр (мм)	100 3	100 3	100 3	100 3	150 3	150 3
Температура колонки, °С	170	210	160	190	190	190
Температура испарителя, °С	220	220	220	220	210	210
Температура детектора, °С	230	230	230	230	230	230
Скорость потока газа-носителя, см /мин	40	40	35	35	60	60
Рабочая шкала электрометра, А	6,4·10	6,4·10	6,4·10	6,4·10	6,4·10	6,4·10
Скорость протяжки ленты самописца, мм	200	200	200	200	200	200
Объем вводимой пробы, мкл	5	5	5	5	5	5
Время удерживания пестицидов:
альфа-ГХЦГ	3 мин 10 с		3 мин 15 с		1 мин 20 с
бета-ГХЦГ	4 мин 23 с		5 мин 24 с		2 мин 10 с
гамма-ГХЦГ	5 мин 32 с		4 мин 22 с		2 мин 10 с
кельтан		12 мин 14 с				4 мин 50 с
гептахлор		6 мин 02 с				2 мин 40 с
альдрин		6 мин 30 с				3 мин 28 с
4,4’-ДДЭ		4 мин 03 с		4 мин 37 с
4,4’-ДДД		6 мин 03 с		6 мин 56 с
4,4’-ДДТ		7 мин 26 с		11 мин 42 с
Линейный диапазон определения, мг:
альфа-ГХЦГ	0,01-0,20		0,03-0,30		0,03-0,20
бета-ГХЦГ	0,03-0,30		0,03-0,4		0,03-0,4
гамма-ГХЦГ	0,03-0,50		0,03-0,5		0,03-0,4
альдрин	0,02-0,2		0,01-0,3		0,02-0,2
кельтан	0,01-0,2		0,01-0,2		0,01-0,2
гептахлор	0,03-0,3		0,03-0,5		0,03-0,2
4,4’-ДДЭ	0,05-0,5		0,01-0,1		0,05-0,5
4,4’-ДДД	0,05-0,5		0,1-1,0		0,1-1,0
4,4’-ДДТ	0,10-0,5		0,1-2,0		0,1-2,0

5.5 Обработка результатов

5.5.1 Содержание пестицидов

,

мг/кг, в анализируемом сырье или консервах вычисляют в соответствии с градуировочными графиками по формуле

,                                                        (2)

где

-

масса пестицида, найденная по градуировочному графику, мкг;

- общий объем раствора, из которого взята аликвота для хроматографирования, см

;

-

масса анализируемой пробы, г;

- объем аликвоты, вводимой в хроматограф, мкдм

.

5.5.2 Вычисления проводят до третьего десятичного знака. Окончательный результат округляют до второго десятичного знака.

5.6 За окончательный результат испытаний принимают среднеарифметическое значение результатов (

) двух параллельных измерений, расхождение между которыми по абсолютной величине не должно превышать 20% по отношению к среднеарифметическому при

0,95.

5.7 Пределы возможных значений систематической составляющей погрешности измерений содержания пестицидов в любой пробе при допускаемых методикой изменениях влияющих факторов ±0,15

.

5.8 При измерении содержания пестицидов в овощах и фруктах, соках, компотах, пюре полнота обнаружения варьирует для альфа-ГХЦГ в пределах 75-89%, бета-ГХЦГ 73-85%, гамма-ГХЦГ (линдан) 77-88%, 4,4’-ДДТ 75-85%, 4,4’-ДДЭ 65-72%, 4,4’-ДДД 75-86%, гептахлора 70-89%, кельтана 73-85%, альдрина 80-95%.

5.9 Минимально обнаруживаемые количества анализируемых соединений с помощью газожидкостной хроматографии составляют: для альфа-, бета-, гамма-ГХЦГ - 0,001 нг, для гептахлора, альдрина и кельтана - 0,01 нг, для 4,4’-ДДТ, 4,4’-ДДЭ и 4,4’-ДДД - 0,6 нг.

5.10 Нижний предел измерения: 0,001 мг/кг для гамма-ГХЦГ, 0,005 мг/кг для кельтана и гептахлора, 0,007 мг/кг для ДДТ и его метаболитов.

5.11 Значение среднеквадратичного отклонения случайной составляющей погрешности измерений содержания пестицидов одной и той же пробы в разных лабораториях при допускаемых методикой изменениях влияющих факторов составляет 0,20

.

5.12 Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать 40% по отношению к среднеарифметическому значению при

0,95.

      6 Требования безопасности

Требования безопасности при анализе пестицидов следует соблюдать согласно "Правилам устройства, техники, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава", утвержденным 20.01.81 N 4225-81.

ПРИЛОЖЕНИЕ А

справочное

 БИБЛИОГРАФИЯ

[1] ТУ 25-1173-102-84 Испаритель ротационный

[2] ТУ 64-1-2451-78 Аппарат универсальный для встряхивания жидкостей в колбах и пробирках АВУ-6с

[3] ТУ 6-09-1705-82 Фильтры обезжиренные, желтая лента

[4] ТУ 25-11-17-89 Пластины для тонкослойной хроматографии "Сорбфил"

[5] ТУ 6-09-3375-78 Реактивы. Гексан

[6] ТУ 6-09-4236-76 Реактивы. Хлороформ

[7] ТУ 6-09-3534-76 Реактивы. Ацетонитрил

[8] ТУ 6-09-13-493-76 Реактивы. 2-Феноксиэтанол

[9] ТУ 6-09-1181-76 Бумага индикаторная универсальная для определения рН